上海远慕生物科技详细为您介绍大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒价格,操作说明书,品牌,优点,操作注意事项等资讯,本司已和国内多所高校,医院,生物公司,科研院等达成了长期合作关系,由本司为其提供进口/国产ELISA试剂盒,培养基,抗体,动物血清,化学试剂,染色试剂盒,标准品,染色液,生化试剂,为客户提供ELISA试剂盒免费代测服务,欢迎来电了解更多产品详情!
中文名:大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒
别名:大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
英文名称:RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit
供应商:上海远慕
产品规格:96T/48T
保存条件:2-8℃低温保存
保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
适用范围:仅用于科研实验,禁用于临床。
检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)。
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
检测原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被样本抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒价格 本试剂盒样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生里盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒价格 本试剂盒注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9、本试剂不同批号组分不得混用。
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断:
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于(参考说明书)。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
本司ELISA试剂盒优势:
(1)、高效、灵敏、特异的抗体;
(2)、稳定的重复性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
(4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
(5)、节省实验经费。
大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒在细胞裂解液裂解细胞之前,必须根据以下方向的测定:
1.贴壁细胞应分离胰蛋白酶和离心后收集(悬浮细胞将离心收集直接)。
2.洗细胞三次冷PBS。
3.悬浮细胞在PBS(1×)和细胞受超声处理4次(或≤冷冻细胞-20°C。用温和的混融细胞。3次重复冻结/解冻周期)。
4.在1500×g离心10分钟在2到8摄氏度去除细胞碎片。细胞培养上清和其他生物液体在1000×g离心20分钟去除样品颗粒和即刻检测或者商店样品在-20°C或稀释后使用80oC。避免重复冻结/解冻循环。