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细胞名称：NEC 人食管癌细胞
培养条件：RPMI-1640 +10% FBS
形 态：贴壁；多角形
背 景：郭永军等建系；甲基苄基亚硝胺（NMB2A）诱发人胎儿食管鳞癌第14代裸小鼠移植瘤组织小块，培养3年，已传40余代，上皮样多边细胞，贴壁生长，裸小鼠移植成功。
NEC细胞;人食管癌细胞传代后不贴壁了，成团浮在培养基里，怎么办？细胞，落层生长后，消化传代，可能细胞密度大，吹打的时候有一些细胞还是成团的，可是大部分已经成单个的了，24小时后观察，细胞都成团了，不贴壁，应该没有污染。现在怎么办？重新吹打能散开吗？
技术回答：NEC细胞;人食管癌细胞密度过大细胞老化了，消化后聚团不贴壁说明细胞状态不好，建议重新复苏细胞。如果不甘心可以重新吹散了试试看，不过估计贴壁的也很少。可以低俗离心把状态不好的聚团细胞去除，然后把上层液体里面的细胞转移至6孔板或者24孔板培养，具体根据最后分散细胞的数量来哦~
重新吹打了NEC细胞;人食管癌细胞，还是有很多贴壁的细胞，可是还是有好多细胞碎片浮着，换了液还是有好多浮着。另外，培养瓶老是弄不均匀，就瓶子的四边都很密集，其他就很均匀，不知道会不会影响细胞状态？
技术回答：密集的地方容易老化，对NEC细胞;人食管癌细胞整体状态还是会有影响的~ 得想办法让传代的细胞均匀分布。传代完后做一下前后左右的十字运动~
细胞处理：细胞如果裂解后，RNA在普通环境下会很快降解。想要不降解，可以考虑：1.加T-Zol裂解液，-80度保存；2.分选后按细胞冻存步骤冻存，存于-80度，应该能放3-6个月。
NEC细胞;人食管癌细胞培养：图片聚焦没聚准，聚团现象不是很严重，状态看着也还行。悬浮细胞对血清要求较高，可以考虑换好点的血清看看。
内皮祖细胞-诱导5x105
牙周膜成纤维细胞5x105
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