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前列腺特异抗原免放试剂盒说明书
PSA(HY-10022) IRMA KIT
一、 概述与临床意义
前列腺特异抗原(total PSA)的检测已广泛用于前列腺疾病(前列腺增生、前列腺癌等)的早期诊断,与游离前列腺特异抗原(free PSA)联合检测时则可以早期鉴别诊断前列腺增生与前列腺癌。联合检测方法为:先对总PSA进行检测,对测值高于阈值的样品再进行游离PSA的检测,根据free PSA/total PSA即可鉴别诊断前列腺癌与前列腺增生。
二、 测定原理
试剂盒采用一步双抗体夹心反应的原理(IRMA法)。固相载体上包被的单克隆抗体、标记PSA抗体(125I-Anti-PSA)分别与待测PSA的不同位点结合形成三层夹心,洗涤后测包被载体的CPM值,通过标准曲线即可计算样品中PSA的含量。包被载体的CPM值与待测样品中PSA的含量成正比。
前列腺特异抗原免放试剂盒说明书三、试剂盒组成
1、 PSA抗体包被管(珠):100管或50管,用后请密封保存。
2、 125I—PSA—Ab: 10.5ml/瓶,1瓶或2瓶,红色,放射性强度小于0.8mci/ml.
3、 PSA标准品:6瓶(S0—S5),浓度分别为0,0.5,2,8,32,64ng/ml.
四、 血样采集:
采用前两周内严禁前列腺指检、前列腺穿刺、尿道器械穿刺等检查。采血后分离血清,避免反复冻融。
五、 操作步骤:
1.包被管法加样程序
单位:ul
标准管S0~S5 | 样本管 | |
标准品 | 100 | —— |
样本 | —— | 100 |
标记物 | 200 | 200 |
2.包被珠法加样程序
单位:ul
标准管S0~S5 | 样本管 | |
标准品 | 100 | —— |
样本 | —— | 100 |
标记物 | 200 | 200 |
包被珠 | 1粒/管 | 1粒/管 |
3.温育
包被珠及包被管法的温育条件相同。加样后从下列反应条件任选其一进行温育,温育完毕后抽净反应液并用蒸馏水洗涤3~4次,每次尽量将水加满反应管,最后一次尽量将管内残液抽干或扣干,以确保检测的准确性。
反应条件代码 | 反应温度 | 反应时间 |
A | 37±1℃ | 2~4小时 |
B | 室温(15~30℃) | 16~24小时 |
C | 室温震荡 | 1小时 |
注:以上各反应条件特异性无差别,但反应时间长时灵敏度高,结合率高。各反应条件均能满足临床检验及科研的需要。
4.测量:用γ计数器测量1分钟计数,并要求于洗涤后24小时内测完。
前列腺特异抗原免放试剂盒说明书六、 数据处理:
a) 使用CASIO—FX3600P的 log—log程序(回归时需将标准品或样品的计数减去S0计数)。
b) 使用专用放免仪提供的IRMA程序。
七、 注意事项:
1、收到试剂盒后应尽快存放在2~8℃;
2、加样前所有试剂包括待测样品要摇匀,并且最好平衡到室温;
3、不同试剂盒或不同月份的同种药盒的组分不得混用;
4、严重溶血的样品往往造成测定值偏高现象;
5、当样品中PSA浓度高于64ng/ml时可将样品用生理盐水稀释后复测,测定浓度乘以稀释倍数即为样品浓度。
八、药盒技术指标与临床参考值:
1、标准范围:0.5~64ng/ml ;
2、灵敏度:<0.1ng/ml
3、精密度:批内CV<8% 批间CV:<12%
九、临床参考值:
正常人检测:有条件的实验室建议建立自己的正常值范围。以下所提供的正常值范围及正常人血清的测值分布仅供参考。另外,正常人PSA的含量随年龄的增加有所提高,检测时应注意受检者年龄情况。
117份30—40岁男性总PSA检测结果:范围0—2.4ng/ml 均值0.60ng/ml
33份正常老年男性总PSA检测结果:范围0—3.5ng/ml 均值1.8ng/ml
部分病理样品的测值情况:
前列腺良性肥大患者(11人):范围6.3—22.6ng/ml, 均值11.2ng/ml;
前列腺癌患者(13人):范围16.8—134.6ng/ml, 均值38.4ng/ml;
阈值:大于等于4ng/ml.
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