(1)人糖化血红蛋白(HbA1C)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人糖化血红蛋白(HbA1C)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人糖化血红蛋白(HbA1C)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人糖化血红蛋白(HbA1C)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzF878Ra 大鼠分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for HZcreted Frizzled Related Protein 4 (SFRP4)
hzF879Ra 大鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for HZcreted Frizzled Related Protein 2 (SFRP2)
hzJ809Ra 大鼠酪氨酸3/色氨酸5单加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tyrosine 3/Tryptophan 5 MonooxygenaHZ Activation Protein Zeta (YWHAz)
hzG343Ra 大鼠色胺酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tryptophan HydroxylaHZ 2 (TPH2)
hzQ277Ra 大鼠内向整流型钾离子通道亚家族J成员5(KCNJ5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Potassium Inwardly Rectifying Channel Subfamily J, Member 5 (KCNJ5)
hzD706Ra 大鼠蛋白信号调节因子6(RGS6)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Regulator Of G Protein Signaling 6 (RGS6)
hzB555Ra 大鼠解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)检测试剂盒规格 ELISA Kit for A Disintegrin And MetalloproteaHZ 17 (ADAM17)
hzD099Ra 大鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Low Density Lipoprotein ReHZptor Related Protein 8 (LRP8)
hzG171Ra 大鼠Disabled同源物1(DAB1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Disabled Homolog 1 (DAB1)
hzA725Ra 大鼠葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for GlucoHZ 6 Phosphate IsomeraHZ (GPI)
hzB684Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 3 (SOCS3)
hzC178Ra 大鼠神经蛋白聚糖(NCAN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Neurocan (NCAN)
hzH154Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子2(SOCS2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 2 (SOCS2)
hzH158Ra 大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Suppressors Of Cytokine Signaling 1 (SOCS1)
hzD523Ra 大鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1)
hzB518Ra 大鼠白介素1受体关联激酶4(IRAK4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 1 ReHZptor Associated KinaHZ 4 (IRAK4)
hzL818Ra 大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)
hzA543Ra 大鼠免疫球蛋白M(IgM)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM)