(1)人微管关联丝/苏氨酸激酶2(MAST2)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人微管关联丝/苏氨酸激酶2(MAST2)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人微管关联丝/苏氨酸激酶2(MAST2)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人微管关联丝/苏氨酸激酶2(MAST2)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
HZB762Mu 小鼠抑制素βB(INHβB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Inhibin Beta B (INHbB)
HZC045Mu 小鼠存活素(Surv)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Survivin (Surv)
HZA960Mu 小鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter G2 (ABCG2)
HZE270Mu 小鼠骨骼肌特异性受体酪氨酸激酶(MUSK)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK)
HZF593Mu 小鼠多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Multimerin 2 (MMRN2)
HZC888Mu 小鼠嗜铬蛋白B(CHGB)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Chromogranin B (CHGB)
HZJ039Mu 小鼠肝再生扩展生长因子(GFER)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Growth Factor, Augmenter Of Liver Regeneration (GFER)
HZB807Mu 小鼠Jagged 1蛋白(JAG1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Jagged 1 Protein (JAG1)
HZC915Mu 小鼠成纤维细胞生长因子13(FGF13)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 13 (FGF13)
HZB501Mu 小鼠10kDa热休克蛋白1(HSP10)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Heat Shock 10kDa Protein 1 (HSP10)
HZF998Mu 小鼠神经肽Y受体Y5(NPY5R)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R)
HZC128Mu 小鼠Gremlin 1蛋白(GREM1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Gremlin 1 (GREM1)
HZC878Mu 小鼠突触融合蛋白2(STX2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Syntaxin 2 (STX2)
HZD035Mu 小鼠突触融合蛋白1A(STX1A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Syntaxin 1A, Brain (STX1A)
HZD759Mu 小鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Catalytic (GCLC)
HZH334Mu 小鼠旁血小板溶蛋白(PPL)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Periplakin (PPL)
HZG850Mu 小鼠促泌素(SCGN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Secretagogin (SCGN)
HZB234Mu 小鼠杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)
HZF839Mu 小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1)
HZG343Mu 人微管关联丝/苏氨酸激酶2(MAST2)检测试剂盒小鼠色胺酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tryptophan Hydroxylase 2 (TPH2)
HZG186Mu 小鼠Podocan蛋白(PODN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Podocan (PODN)
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