大鼠乙酰胆碱酯酶(ACHE)ELISA试剂盒实验操作中常见问题分析
由于大鼠乙酰胆碱酯酶(ACHE)ELISA试剂盒具有灵敏度较高、特异性好的特点,已广泛应用于各种传染性疾病的筛查如肝炎、爱滋、优生优育等。虽然洗板只是ELISA实验重要环节中的一个,但作为专业的洗板机生产厂家,我们必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。优质的 试剂 ,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。如不注意,就易出现白板、花板、色弱和假阳性等现象。尤其是花板现象(就是空白、阴性、阳性对照以及室内质控孔结果正常,而标本孔的OD值却明显偏高)是各个厂家洗板机调试中经常遇到的问题。现将ELISA实验操作中注意事项总结如下,以期给大家带来一些启发,以改善洗板机的安装调试水平,提高临床检测质量。
大鼠乙酰胆碱酯酶(ACHE)ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素
严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
大鼠乙酰胆碱酯酶(ACHE)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;最好使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
xyA106Hu 人神经营养因子3(NT3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neurotrophin 3 (NT3)
xyA107Hu 人神经营养因子4(NT4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neurotrophin 4 (NT4)
xyA108Hu 人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG)
xyA110Hu 人抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Oncostatin M (OSM)
xyA114Hu 人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for PlaHZnta Growth Factor (PLGF)
xyA116Hu 人调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-HZll Expressed And Secreted (RANTES)
xyA118Hu 人CD30配体(CD30L)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L)
xyA119Hu 人CD40配体(CD40L)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L)
xyA120Hu 人干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Stem HZll Factor (SCF)大鼠乙酰胆碱酯酶(ACHE)ELISA试剂盒
xyA121Hu 人干细胞因子受体(SCFR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Stem HZll Factor ReHZptor (SCFR)
xyA122Hu 人基质细胞衍生因子1(SDF1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Stromal HZll Derived Factor 1 (SDF1)
xyA123Hu 人转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)
xyA124Hu 人转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
xyA125Hu 人免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1)
xyA126Hu 人内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2)
xyA128Hu 人组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2)
xyA129Hu 人组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3)
xyA130Hu 人组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4)
xyA133Hu 人肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)