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小鼠白血病细胞G-CSF依赖性

小鼠白血病细胞G-CSF依赖性

价格: 1

品牌:ATCC

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货号:xy-1979

规格:

小鼠白血病细胞G-CSF依赖性操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,小鼠白血病细胞G-CSF依赖性此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!

细胞传代培养(消化法)具体操作:

一:传代前准备;

1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液:小鼠白血病细胞G-CSF依赖性取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。

二:胰蛋白酶消化;

1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。

2. 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。

三:吹打分散细胞;

1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四:分装稀释细胞;

1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。

五:继续培养;

用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。小鼠白血病细胞G-CSF依赖性传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。  

XY0673 人乳腺癌细胞,MCF-7/ER36细胞

XY0674 人乳腺癌细胞,MCF-7(OLD)细胞

XY0675 人乳腺癌细胞,MCF-7(NEW)细胞

XY0676 人乳腺癌细胞,MCF7 [MCF-7]细胞

XY0677 人乳腺癌细胞,MB-271细胞

XY0678 人乳腺癌细胞,M453细胞

XY0679 人乳腺癌细胞,LCC1细胞

XY0680 人乳腺癌细胞,Human MDA-MB-231细胞

XY0681 人乳腺癌细胞,Hs-578T细胞

XY0682 人乳腺癌细胞,HCC1937细胞

XY0683 人乳腺癌细胞,ER-30细胞

XY0684 人乳腺癌细胞,BT-549细胞

XY0685 人乳腺癌细胞,Bcap-37细胞

XY0686 人乳腺癌细胞,4T1细胞

XY0687 人乳腺癌瘤株 MCF-7细胞

XY0688 人乳腺癌抗雌激素耐药株 LCC9细胞

XY0689 人乳腺癌高转移细胞,MDA-MB-435S细胞

XY0690 人乳腺癌阿霉素耐药细胞株 MCF/Adr细胞

XY0691 人乳腺癌Tamoxifen耐药株 LCC2细胞

XY0692 人乳腺癌 Bcap-37细胞,

XY0693 人乳癌 MNK-7细胞

XY0694 人绒毛膜癌细胞,JEG-3细胞,

XY0695 人绒癌细胞耐药株 JEG-3/VP16细胞

XY0696 人绒癌细胞,JEG细胞,

XY0697 人绒癌细胞,JEG-3细胞

XY0698 人人胚肾细胞,AAV-293细胞

XY0699 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞,M619细胞

XY0700 人前列腺正常细胞,rwpe2细胞,

XY0701 人前列腺上皮细胞,RWPE1细胞

XY0702 人前列腺癌细胞高转移亚系 PC-3M 2B4细胞

XY0703 人前列腺癌细胞,VLcop细胞





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