人凝血酶(TM)检测试剂盒操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在人凝血酶(TM)检测试剂盒检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,
每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
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加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔
中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
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于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,
37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
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人凝血酶(TM)检测试剂盒其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
HZA044Hu ELISA Kit for Growth Hormone (GH) 人生长激素(GH)检测试剂盒
HZA045Hu ELISA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)检测试剂盒
Macrophage (GMCSF)
HZA046Hu ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130) 人糖蛋白130(gp130)检测试剂盒
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HZA548Hu ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 1 (ICAM1) 人细胞间粘附分子1(ICAM1)检测试剂盒
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(TGFbR1)
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HZA379Hu ELISA Kit for Proinsulin (PI) 人胰岛素原(PI)检测试剂盒
HZA807Hu ELISA Kit for Fucosidase Alpha L1, Tissue (FUCa1) 人岩藻糖苷酶αL1(FUCα1)检测试剂盒
HZA557Hu ELISA Kit for Thyroid Peroxidase (TPO) 人甲状腺过氧化物酶(TPO)检测试剂盒
CEA380Hu ELISA Kit for Vasoactive Intestinal Peptide (VIP) 人血管活性肠肽(VIP)检测试剂盒
CEA393Hu ELISA Kit for Substance P (SP) 人P物质(SP)检测试剂盒