人原胚肾转化细胞系操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,人原胚肾转化细胞系此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:人原胚肾转化细胞系取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 人原胚肾转化细胞系 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。人原胚肾转化细胞系传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1379 假交替单胞菌
XY1380 假单胞杆菌
XY1381 甲状腺癌细胞(未分化 )ARO细胞
XY1382 甲型副伤寒沙门氏菌
XY1383 荚膜红细菌
XY1384 寄生曲霉
XY1385 急性淋巴母细胞白血病细胞,MOLT-4细胞
XY1386 急性T细胞白血病细胞) Jurkat细胞
XY1387 急性T淋巴细胞白血病细胞,TALL-104细胞
XY1388 急髓白血病细胞,HL60细胞
XY1389 畸胎癌细胞,P19细胞
XY1390 鸡油菌
XY1391 鸡腿蘑(毛头鬼伞)
XY1392 鸡胚原代肝细胞,CEL细胞
XY1393 鸡胚成纤维细胞,UMNSAH/DF-1细胞
XY1394 鸡淋巴瘤细胞,DT40细胞
XY1395 黄直丝链霉菌
XY1396 黄色短杆菌
XY1397 黄曲霉
XY1398 黄绿青霉
XY1399 黄绿绿僵菌
XY1400 黄杆菌属
XY1401 环状芽孢杆菌
XY1402 化学转化小鼠鼻咽上皮细胞,TMNE细胞
XY1403 化脓性链球菌
XY1404 厚孢根霉
XY1405 猴肾细胞系 VERO E6细胞
XY1406 猴肾细胞系 MA-104细胞
XY1407 猴肾细胞系 BSC-1细胞
XY1408 猴肾细胞,Marc145细胞
XY1409 猴肾C M145细胞
XY1410 猴胚胎肾上皮细胞,marc-145-EGFP-puro细胞
XY1411 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞
XY1412 猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞, RF/6A细胞
XY1413 猴的骨髓间充质干细胞,MSCS细胞
XY1414 喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞
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