尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZA766Ra ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 10 (ADAM10) 大鼠解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)检测试剂盒
CEB203Ra ELISA Kit for Neurotensin (NT) 大鼠神经降压素(NT)检测试剂盒
HZC319Ra ELISA Kit for Aromatase (ARO) 大鼠芳香酶(ARO)检测试剂盒
HZB171Ra ELISA Kit for Transferrin Receptor (TFR) 大鼠转铁蛋白受体(TFR)检测试剂盒
CEA575Ra ELISA Kit for Motilin (MTL) 大鼠胃动素(MTL)检测试剂盒
HZB830Ra ELISA Kit for Transglutaminase 2, Tissue (TGM2) 大鼠组织转谷氨酰胺酶(TGM2)检测试剂盒
HZJ560Ra ELISA Kit for Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase 大鼠支链α-酮酸脱氢酶(BCKDK)检人淀粉样前体蛋白(APP)检测试剂盒测试剂盒
(BCKDK)
HZD312Ra ELISA Kit for Cytochrome P450 Reductase (CPR) 大鼠细胞色素P450氧化还原酶(CPR)检测试剂盒
HZD993Ra ELISA Kit for Cathepsin G (CTSG) 大鼠组织蛋白酶G(CTSG)检测试剂盒
HZA671Ra ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 3 (GSTa3) 大鼠谷胱甘肽S转移酶α3(GSTα3)检测试剂盒
HZG342Ra ELISA Kit for Tryptophan Hydroxylase 1 (TPH1) 大鼠色胺酸羟化酶1(TPH1)检测试剂盒
HZC130Ra ELISA Kit for Noggin (NOG) 大鼠头蛋白(NOG)检测试剂盒
HZB592Ra ELISA Kit for Caspase 1 (CASP1) 大鼠胱天蛋白酶1(CASP1)检测试剂盒
HZA738Ra ELISA Kit for Activated Protein C (APC) 大鼠激活蛋白C(APC)检测试剂盒
HZB226Ra ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 大鼠皮质醇结合球蛋白(CBG)检测试剂盒
HZE765Ra ELISA Kit for Interleukin 23 Receptor (IL23R) 大鼠白介素23受体(IL23R)检测试剂盒
HZJ516Ra ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 大鼠卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒
HZJ545Ra ELISA Kit for Bcl2/Adenovirus E1B 19kDa Interacting 大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)检测试剂盒
Protein 3 (BNIP3)
HZC401Ra ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone Binding 大鼠促肾上腺皮质素释放激素结合蛋白(CRHBP)检测试剂盒