尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人蛋白激酶抑制剂β(PKIβ)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人蛋白激酶抑制剂β(PKIβ)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人蛋白激酶抑制剂β(PKIβ)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人蛋白激酶抑制剂β(PKIβ)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZC071Hu ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha 人干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒
Chemoattractant (ITaC)
HZQ870Hu ELISA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3) 人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒
HZD387Hu ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) 人白细胞弹性蛋白酶抑制因子(LEI)检测试剂盒
HZL060Hu ELISA Kit for 人蛋白激酶抑制剂β(PKIβ)检测试剂盒rkinson Disease Protein 2 (PARK2) 人帕金森氏病蛋白2(PARK2)检测试剂盒
HZC358Hu ELISA Kit for Calpain 2, Large Subunit (CAPN2) 人钙蛋白酶2(CAPN2)检测试剂盒
HZC457Hu ELISA Kit for Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) 人内切核酸酶G(ENDOG)检测试剂盒
CED065Hu ELISA Kit for Apelin 17 (AP17) 人Apelin 17蛋白(AP17)检测试剂盒
HZF258Hu ELISA Kit for Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1) 人小亚基钙蛋白酶1(CAPNS1)检测试剂盒
HZH136Hu ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain 人丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基3(SPTLC3)检测试剂盒
Base Subunit 3 (SPTLC3)
HZH645Hu ELISA Kit for Microphthalmia Associated Transcription Factor (MITF) 人眼小畸形关联转录因子(MITF)检测试剂盒
HZL074Hu ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3 Component 人泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)检测试剂盒
N-Recognin 4 (UBR4)
HZP783Hu ELISA Kit for Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10) 人非ATP酶蛋白酶体26S亚基10(PSMD10)检测试剂盒
HZE123Hu ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 3 (EPHA3) 人肝配蛋白A受体3(EPHA3)检测试剂盒
HZE233Hu ELISA Kit for Baculoviral IAP Repeat Containing Protein 6 人含杆状病毒IAP重复蛋白6(BIRC6)检测试剂盒