尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZA816Hu ELISA Kit for Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP) 人α1-酸性糖蛋白(α1AGP)检测试剂盒
HZA817Hu ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt) 人结合珠蛋白(Hpt)检测试剂盒
HZA068Hu ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) 人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒
CEA803Hu ELISA Kit for Neuromedin B (NMB) 人神经介素B(NMB)检测试剂盒
HZA886Hu ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated 人过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)检测试剂盒
Receptor Gamma (PPARg)
HZA820Hu ELISA Kit for C人白细胞弹性蛋白酶(HLE)检测试剂盒oagulation Factor II (F2) 人凝血因子Ⅱ(F2)检测试剂盒
HZA819Hu ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)检测试剂盒
HZA887Hu ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP) 人丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)检测试剂盒
HZA861Hu ELISA Kit for Complement Component 3 (C3) 人补体成分3(C3)检测试剂盒
HZA857Hu ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16) 人克拉拉细胞蛋白16(CC16)检测试剂盒
HZA890Hu ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA) 人表面活性物质关联蛋白A(SPA)检测试剂盒
HZA439Hu ELISA Kit for Protein Kinase C Epsilon (PKCe) 人蛋白激酶Cε(PKCε)检测试剂盒
HZA889Hu ELISA Kit for Renin (REN) 人肾素(REN)检测试剂盒
HZA888Hu ELISA Kit for Complement Component 4 (C4) 人补体成分4(C4)检测试剂盒
CEA796Hu ELISA Kit for Neuropeptide S (NPS) 人神经肽S(NPS)检测试剂盒
HZA600Hu ELISA Kit for Granzyme B (GZMB) 人颗粒酶B(GZMB)检测试剂盒
HZA601Hu ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 人髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒
HZA602Hu ELISA Kit for Peroxisomal Biogenesis Factor 2 (PEX2) 人过氧化物酶体生物合成因子2(PEX2)检测试剂盒
HZA774Hu ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Alpha (GRa) 人糖皮质激素受体α(GRα)检测试剂盒
HZA773Hu ELISA Kit for Glucocorticoid Receptor Beta (GRb) 人糖皮质激素受体β(GRβ)检测试剂盒
HZB058Hu ELISA Kit for Caspase Activated DNase (CAD) 人胱天蛋白酶激活脱氧核糖核酸酶(CAD)检测试剂盒
HZB061Hu ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase (PDI) 人蛋白二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒
HZB062Hu ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein 人70kDa热休克蛋白1样蛋白(HSPA1L)检测试剂盒
(HSPA1L)
HZB063Hu ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) 人泛素结合酶E2A(UBE2A)检测试剂盒
HZB064Hu ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF) 人凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒