尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人Smad同源物4 (Smad4/MADH4)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人Smad同源物4 (Smad4/MADH4)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人Smad同源物4 (Smad4/MADH4)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人Smad同源物4 (Smad4/MADH4)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZC071Hu ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha 人干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒
Chemoattractant (ITaC)
HZQ870Hu ELISA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3) 人含BED型锌指蛋白3(ZBED3)检测试剂盒
HZD387Hu ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) 人白细胞弹性蛋白酶抑制因子(LEI)检测试剂盒
HZL060Hu ELISA Kit for Parkinson Disease Protein 2 (PARK2) 人帕金森氏病蛋白2(PARK2)检测试剂盒
HZC358Hu ELISA Kit for Calpain 2, Large Subunit (CAPN2) 人钙蛋白酶2(CAPN2)检测试剂盒
HZC457Hu ELISA Kit for Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) 人内切核酸酶G(ENDOG)检测试剂盒 人Smad同源物4 (Smad4/MADH4)检测试剂盒
CED065Hu ELISA Kit for Apelin 17 (AP17) 人Apelin 17蛋白(AP17)检测试剂盒
HZF258Hu ELISA Kit for Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1) 人小亚基钙蛋白酶1(CAPNS1)检测试剂盒
HZH136Hu ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain 人丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基3(SPTLC3)检测试剂盒
Base Subunit 3 (SPTLC3)
HZH645Hu ELISA Kit for Microphthalmia Associated Transcription Factor (MITF) 人眼小畸形关联转录因子(MITF)检测试剂盒
HZL074Hu ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3 Component 人泛素蛋白连接酶E3成分N-识别蛋白4(UBR4)检测试剂盒
N-Recognin 4 (UBR4)
HZP783Hu ELISA Kit for Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10) 人非ATP酶蛋白酶体26S亚基10(PSMD10)检测试剂盒
HZE123Hu ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 3 (EPHA3) 人肝配蛋白A受体3(EPHA3)检测试剂盒
HZE233Hu ELISA Kit for Baculoviral IAP Repeat Containing Protein 6 人含杆状病毒IAP重复蛋白6(BIRC6)检测试剂盒
(BIRC6)
HZF950Hu ELISA Kit for Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4 (SPTbN4) 人非红细胞血影蛋白β4(SPTβN4)检测试剂盒
HZC516Hu ELISA Kit for Growth Hormone Secretagogue Receptor (GHSR) 人生长激素促分泌素受体(GHSR)检测试剂盒
HZG697Hu ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 120 (GPR120) 人G蛋白偶联受体120(GPR120)检测试剂盒
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