获取电话温育是小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。
温育这一步是临床小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1～2小时才能有较完全的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：
（1）要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时，总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。因此，为保证37℃下足够的温育时间，小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节（不同室温下）微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃，从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是，用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
（2）温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中，指出温育温度可有两种，例如，一种是37℃下1小时，另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看，在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2～8℃下反应24小时。较高的反应温度，由于分子运动的加怜惜，反应时间缩短，这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题，但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此，我们建议在临床小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。
（3）“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深，产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规 ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。
总而言之，在临床小鼠细胞分裂周期因子25(CDC25)检测试剂盒测定中，要保证好的测定效果，可采用下述简单办法来确保温育条件，即尽量采用水浴，温育中让微孔板浮于水面上，或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒，放于温箱中，这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触，以及水浴箱或湿盒内的高温度，而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。
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HZA110Mu 小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Oncostatin M (OSM)
HZA113Mu 小鼠核糖核酸酶T2(RNASET2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2)
HZA118Mu 小鼠CD30配体(CD30L)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L)
HZA119Mu 小鼠CD40配体(CD40L)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L)
HZA120Mu 小鼠干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)
HZA124Mu 小鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1)
HZA133Mu 小鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
HZA134Mu 小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb)
HZA135Mu 小鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO)
HZA158Mu 小鼠激活素AB(ACVAB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Activin AB (ACVAB)
HZA160Mu 小鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
HZA164Mu 小鼠泛素(Ub)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)
HZA181Mu 小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)
HZA196Mu 小鼠半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb)
HZA208Mu 小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)
HZA225Mu 小鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)
HZA235Mu 小鼠补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)
HZA270Mu 小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Linker For Activation Of T-Cell (LAT)
HZA222Mu 小鼠干扰素β(IFNβ)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb)
HZA441Mu 小鼠黄体激素(LH)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Luteinizing Hormone (LH)
HZA447Mu 小鼠C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for C-Peptide
HZA451Mu 小鼠激肽释放酶5(KLK5)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Kallikrein 5 (KLK5)
HZA696Mu 小鼠二氢硫辛酸转乙酰基酶(DLAT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)
HZA569Mu 小鼠P选择素(SELP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Selectin, Platelet (SELP)
HZA570Mu 小鼠Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP)
