人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA150Ra 大鼠癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen (CEA)
HZB438Ra 大鼠酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)
HZA178Ra 大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)
HZA446Ra 大鼠抑制素βC(INHβC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Inhibin Beta C (INHbC)
HZA208Ra 大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)
HZA303Ra 大鼠半乳糖凝集素3(GAL3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3)
HZA598Ra 大鼠微粒体谷胱甘肽S转移酶2(MGST2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Microsomal Glutathione S Transferase 2 (MGST2)
HZA307Ra 大鼠半乳糖凝集素7(GAL7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 7 (GAL7)
HZA309Ra 大鼠半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 9 (GAL9)
HZA115Ra 大鼠前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Prokineticin 2 (PK2)
HZC011Ra 大鼠补体因子B(CFB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)
HZA117Ra 大鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)
HZB231Ra 大鼠角蛋白18(KRT18)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18)
HZB966Ra 大鼠多配体蛋白聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1)
HZA565Ra 大鼠硫酸肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heparan Sulfate Proteoglycan (HSPG)
HZC060Ra 大鼠血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha (PDGFRa)
HZB949Ra 大鼠转化生长因子β3(TGFβ3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3)
HZA734Ra 大鼠蛋白C(PROC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein C (PROC)
HZA147Ra 大鼠脂联素受体1(ADIPOR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1)
HZA274Ra 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6)
HZC659Ra 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5)
HZC024Ra 大鼠线粒体乙醛脱氢酶(ALDM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM)
HZA224Ra 大鼠基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)
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