人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人晶体蛋白β(Cryβ)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZC276Hu 人氨基酰化酶1(ACY1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1)
HZC281Hu 人腺苷激酶(ADK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK)
HZC295Hu 人无羊膜蛋白(AMN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Amnionless (AMN)
HZC304Hu 人Attractin蛋白(ATRN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Attractin (ATRN)
HZC340Hu 人胱天蛋白酶6(CASP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 6 (CASP6)
HZC393Hu 人皮质醇稳定蛋白(CORT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cortistatin (CORT)
HZC397Hu 人羧肽酶M(CPM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carboxypeptidase M (CPM)
HZC411Hu 人肘臀蛋白(CUBN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cubilin (CUBN)
HZC426Hu 人细胞球蛋白(CYGB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB)
HZC480Hu 人脂筏特征蛋白2(FLOT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Flotillin 2 (FLOT2)
HZC520Hu 人透明质酸合酶1(HAS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)
HZC551Hu 人Janus激酶1(JAK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Janus Kinase 1 (JAK1)
HZC554Hu 人驱动蛋白2(KNS2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kinesin 2 (KNS2)
HZC559Hu 人吻素1(KISS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1)
HZC625Hu 人巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST)
HZC692Hu 人旋光蛋白(OPTC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Opticin (OPTC)
HZC754Hu 人网蛋白(PLEC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Plectin (PLEC)
HZC769Hu 人核糖体结合糖蛋白Ⅰ(RPN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ribophorin I (RPN1)
HZC821Hu 人硫嘌呤甲基转移酶(TPMT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thiopurine Methyltransferase (TPMT)
HZC822Hu 人血栓烷受体(TP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thromboxane Receptor (TP)
HZC856Hu 人Smoothelin蛋白(SMTN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Smoothelin (SMTN)
HZC952Hu 人窖蛋白2(CAV2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caveolin 2 (CAV2)
HZC960Hu 人钙蛋白酶3(CAPN3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Calpain 3 (CAPN3)
HZC970Hu 人组织蛋白酶V(CTSV)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin V (CTSV)