人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HEA105Hu 人神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法,高敏) High Sensitive ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)
HZB139Hu 人抗利尿激素(ADH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH)
HZH292Hu 人妊娠特异性β1-糖蛋白2(PSG2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 2 (PSG2)
HZA554Hu 人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)
HZN863Hu 人Osterix蛋白(OSX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osterix (OSX)
HZD251Hu 人线粒体铁蛋白(FTMT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT)
HZE426Hu 人二价金属转运蛋白1(DMT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Divalent Metal Transporter 1 (DMT1)
HZH308Hu 人鱼精蛋白1(PRM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protamine 1 (PRM1)
HZH789Hu 人铁反应元件结合蛋白2(IREB2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Iron Responsive Element Binding Protein 2 (IREB2)
HZW786Hu 人柯萨奇病毒腺病毒受体样膜蛋白(CLMP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coxsackie And Adenovirus Receptor Like Membrane Protein (CLMP)
HZL331Hu 人补体因子H相关蛋白5(CFHR5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor H Related Protein 5 (CFHR5)
HZN191Hu 人含半胱氨酸丰富分泌蛋白LCCL域蛋白2(CRISPLD2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cysteine Rich Secretory Protein LCCL Domain Containing Protein 2 (CRISPLD2)
HZA417Hu 人鞘磷脂脂质蛋白1(PLP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteolipid Protein 1, Myelin (PLP1)
HZA999Hu 人鞘磷脂蛋白0(MPZ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Protein Zero, Myelin (MPZ)
HZB704Hu 人血型糖蛋白A(GYPA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycophorin A (GYPA)
HZB861Hu 人丝切蛋白2(CFL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cofilin 2, Muscle (CFL2)
HZC124Hu 人Smad同源物2(Smad2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 2 (Smad2)
HZC441Hu 人二肽酶1(DPEP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dipeptidase 1, Renal (DPEP1)
HZC681Hu 人去甲肾上腺素转运蛋白(NET)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Norepinephrine Transporter (NET)
HZC994Hu 人谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 4 (GPX4)
CED057Hu 人7-脱氢胆固醇(7-DHC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol (7-DHC)
HZD470Hu 人芳香烃受体核转位因子(ARNT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT)