人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZE134Hu 人防御素α6(DEFα6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Defensin Alpha 6, Paneth Cell Specific (DEFa6)
HZH262Hu 人受体活性修饰蛋白2(RAMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Receptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2)
HZH194Hu 人B类清道夫受体1(SCARB1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Scavenger Receptor Class B Member 1 (SCARB1)
HZD827Hu 人ⅡA组磷脂酶A2(PLA2G2A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A)
HZD317Hu 人糖原合酶激酶3β(GSK3β)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b)
HZD164Hu 人核糖核酸酶L(RNASEL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ribonuclease L (RNASEL)
HZB207Hu 人C-型凝集素域家族2成员C(CLEC2C)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)
HZF543Hu 人溶血磷脂酸受体3(LPAR3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3)
HZB434Hu 人蛋白酶3(PR3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3)
HZG796Hu 人钴胺传递蛋白Ⅱ(TCN2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transcobalamin II, Macrocytic Anemia (TCN2)
HZH663Hu 人世间甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
HZF813Hu 人Anoctamin 6蛋白(ANO6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anoctamin 6 (ANO6)
HZF173Hu 人17-β-羟基类固醇脱氢酶3(HSD17β3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3)
HZC232Hu 人C-Raf原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶(CRAF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (CRAF)
HZD824Hu 人血小板反应蛋白4(THBS4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4)
HZF839Hu 人转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1)
HZC221Hu 人早幼粒细胞白血病蛋白(PML)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Promyelocytic Leukemia Protein (PML)
HZF625Hu 人腱蛋白样蛋白1(CHRDL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chordin Like Protein 1 (CHRDL1)
HZH536Hu 人NFKB抑制因子(NKRF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for NFKB Repressing Factor (NKRF)
HZM464Hu 人饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)
HZE002Hu 人CREB结合蛋白(CREBBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for CREB Binding Protein (CREBBP)
HZC489Hu 人膜铁转运蛋白(FPN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferroportin (FPN)
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