人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人广谱细胞角蛋白(P-CK)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12906 猪髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Porcine myeloperoxidase,MPO ELISAkit
hz-E12907 猪超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 Porcine Super Oxidase Dimutase,SOD ELISAkit
hz-E12908 猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒 Porcine von Willebrand Factor,vWF ELISAkit
hz-E12909 猪黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒 Porcine melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISAkit
hz-E12910 猪可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 Porcine soluble vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISAkit
hz-E12911 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒 Porcine Vascular Endothelial-Cadherin Complex,VE-cad ELISAkit
hz-E12912 猪去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒 Porcine Noradrenaline,NE ELISAkit
hz-E12913 猪血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 Porcine angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISAkit
hz-E12914 猪凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒 Porcine Factor-related Apoptosis,FAS ELISAkit
hz-E12915 猪B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISAkit
hz-E12916 猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 Porcine Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISAkit
hz-E12917 猪氢化可的松(HYD)ELISA试剂盒 Porcine Hydrocortisone,HYD ELISAkit
hz-E12918 猪一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 Porcine nitric oxide,NO ELISAkit
hz-E12919 猪内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISAkit
hz-E12920 猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 Porcine Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISAkit
hz-E12921 猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISAkit
hz-E12922 猪血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒 Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2,Tie-2 ELISAkit
hz-E12923 猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒 Porcine Angiopoietin 1,ANG-1 ELISAkit
hz-E12924 猪乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 Porcine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISAkit
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