人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12155 小鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒 Mouse Vitamin B6,VB6 ELISAkit
hz-E12156 小鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) ELISA试剂盒 Mouse Collagen Type Ⅰ,Col ⅠELISAkit
hz-E12157 小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISAkit
hz-E12158 小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 Mouse soluble P-selectin,sP-selectin ELISAkit
hz-E12159 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒 Mouse Soluble protein-100,S-100 ELISAkit
hz-E12160 小鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 1,IL-1 ELISAkit
hz-E12161 小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 1β,IL-1β ELISAkit
hz-E12162 小鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒 Mouse Myoglobin,MYO/MB ELISAkit
hz-E12163 小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒 Mouse Thromboxane B2,TXB2 ELISAkit
hz-E12164 小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒 Mouse acetylcholine,ACH ELISAkit
hz-E12165 小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 Mouse Leukotriene B4,LT-B4 ELISAkit
hz-E12166 小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 Mouse leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISAkit
hz-E12167 大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)ELISA试剂盒 Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb ELISAkit
hz-E12168 大鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒 Rat Neuroglobin,NGB ELISAkit
hz-E12169 大鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒 Rat Thrombopoietin,TPO ELISAkit
hz-E12170 大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒 Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 ELISAkit
hz-E12171 大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒 Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISAkit
hz-E12172 大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISAkit
hz-E12173 大鼠白介素7(IL-7)ELISA试剂盒 Rat Interleukin-7,IL-7 ELISAkit
hz-E12174 大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒 Reat serine/threonine protein kinase,STK ELISAkit
hz-E12175 大鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒 Rat anti-red cell antibody ELISAkit