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一键询价人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11018 人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA试剂盒 Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISAkit
hz-E11019 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISAkit
hz-E11020 人精氨酸酶(Arg)ELISA试剂盒 Human Arginase,Arg ELISAkit
hz-E11021 人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒 Human neutrophilic alkaline phosphatase,NAP ELISAkit
hz-E11022 人间变性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA试剂盒 Human anapastic lymphoma kinase,ALK ELISAkit
hz-E11023 人激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA试剂盒 Human cytokinin MB,CKMB ELISAkit
hz-E11024 人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒 Human myosin light chain kinase,MLCK ELISAkit
hz-E11025 人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒 Human glutathione S-transferases,GSTpi ELISAkit
hz-E11026 人谷胱甘肽S转移酶(GSTs)ELISA试剂盒 Human glutathione S-transferases,GSTs ELISAkit
hz-E11027 人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒 Human deubiquitinating enzyme,DUB ELISAkit
hz-E11028 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒 Human secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISAkit
hz-E11029 人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA试剂盒 Human E3/ubiquitin-protein ligase,E3/UBPL ELISAkit
hz-E11030 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)ELISA试剂盒 Human mast cell tryptase,MCT ELISAkit
hz-E11031 人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒 Human dopachrome tautomerase,DT ELISAkit
hz-E11032 人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA试剂盒 Human E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISAkit
hz-E11033 人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒 Human protein disulfide isomerase,PDI ELISAkit
hz-E11034 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISAkit
hz-E11035 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒 Humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-ECS ELISAkit
hz-E11036 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISAkit
hz-E11037 人胃蛋白酶(PP)ELISA试剂盒 Human Pepsin,PP ELISAkit
hz-E11038 人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 Human Hexokinase,HK ELISAkit
hz-E11039 人丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISAkit
hz-E11040 人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 Human glycogen synthase kinase,GSK ELISAkit