人总抗氧化状态(TOS)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人总抗氧化状态(TOS)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人总抗氧化状态(TOS)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人总抗氧化状态(TOS)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E10644 人雌激素受体(ER)ELISA试剂盒 Human Estrogen Receptor,ER ELISAkit
hz-E10645 人超敏生长激素(U S-GH)ELISA试剂盒 Human Ultra Sensitive growth hormone,U S-GH ELISAkit
hz-E10646 人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)ELISA试剂盒 Human Ultra Sensitive Prostate Specific Antigen,PSA U S ELISAkit
hz-E10647 人苯丙酸诺龙/苯丙酸去甲睾酮(NP)ELISA试剂盒 Human Nandrolone Phenylpropionate,NP ELISAkit
hz-E10648 人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒 Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISAkit
hz-E10649 人氢化可的松(HYD)ELISA试剂盒 Human Hydrocortisone,HYD ELISAkit
hz-E10650 人糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒 Human glucocorticoid receptor-β,GR-β ELISAkit
hz-E10651 人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒 Human glucocorticoid receptor-α,GR-α ELISAkit
hz-E10652 人高敏三碘甲状腺原氨酸(u-T3)ELISA试剂盒 Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISAkit
hz-E10653 人黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒 Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISAkit
hz-E10654 人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISAkit
hz-E10655 人肾素(Renin)ELISA试剂盒 Human Renin ELISAkit
hz-E10656 人肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒 Human Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISAkit
hz-E10657 人雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 Human Estradiol receptor,ER ELISAkit
hz-E10658 人甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISAkit
hz-E10659 人血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 Human angiotensinogen,aGT ELISAkit
hz-E10660 人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISAkit
hz-E10661 人卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒 Human Follistatin,FS ELISAkit
hz-E10662 人甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒 Human Parathyroid Hormone Related Protein,PTHrP ELISAkit
hz-E10663 人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒 Human catecholamine,CA ELISAkit
hz-E10664 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒 Human Cystatin C,Cys-C ELISAkit