人维生素B6ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人维生素B6ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人维生素B6ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人维生素B6ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E10340 人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒 Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISAkit
hz-E10341 人纤维连接素相关抗原(FRA)ELISA试剂盒 Human fibronection related antigen,FRA ELISAkit
hz-E10342 人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒 Human gastrin cell antibody,GCA ELISAkit
hz-E10343 人谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH)ELISA试剂盒 Human Glutamate dehydrogenase;GDH/GLDH ELISAkit
hz-E10344 人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒 Human heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISAkit
hz-E10345 人胆酸(CA)ELISA试剂盒 Human Cholic acid,CA ELISAkit
hz-E10346 人幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 Human Helicobacter pylori IgG ,Hp-IgG ELISAkit
hz-E10347 人γ谷氨酰转移酶(GGT) ELISA试剂盒 Human gamma glutamyl transpeptidase,GGT ELISAkit
hz-E10348 人胃粘液素(GM)ELISA试剂盒 Human Gastric Mucin,GM ELISAkit
hz-E10349 人透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒 Human Hya]uronate binding protein,HABP ELISAkit
hz-E10350 人Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒 Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISAkit
hz-E10351 人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA试剂盒 Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISAkit
hz-E10352 人细胞毒素相关蛋白A(CagA)ELISA试剂盒 Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISAkit
hz-E10353 人胃抑素(GIP)ELISA试剂盒 Human gastric inhibitory polypeptide,GIP ELISAkit
hz-E10354 人胃泌素释放多肽(GRP)ELISA试剂盒 Human gastrin-reliasing peptide,GRP ELISAkit
hz-E10355 人胃泌素释放肽前体(ProGRP)ELISA试剂盒 Human pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISAkit
hz-E10356 人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒 Human Collagen-like Bioprotein Ⅱ,HCBⅡ ELISAkit
hz-E10357 人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA试剂盒 Human Secretin ELISAkit
hz-E10358 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒 Human Peptide YY ELISAkit
hz-E10359 人促胃液素受体(GsaR)ELISA试剂盒 Human gastrin receptor,GsaR ELISAkit
hz-E10360 人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒 Human cholecystokinin octapeptide,CCK-8 ELISAkit
hz-E10361 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISAkit