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DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶兔抗猪IgG
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。兔抗猪IgG
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
兔抗猪IgG相关产品系列表:
xyC061Hu 人血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Receptor Beta
(PDGFRb)
xyB924Hu 人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide
Phosphate Oxidase 4 (NOX4)
xyB982Hu 人内皮素受体B(ETRB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Endothelin Receptor B (ETRB)
xyB416Hu 人葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Glucuronidase Beta (GUSb)
xyB650Hu 人主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP)
xyA662Hu 人白介素7(IL7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 7 (IL7)
xyB886Hu 人血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)
xyC036Hu 人转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transferrin (TRF)
xyA303Hu 人半乳糖凝集素3(GAL3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3)
xyA131Hu 人转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein
兔抗猪IgG
(TGFbI)
xyC047Hu 人Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P)
xyC130Hu 人头蛋白(NOG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Noggin (NOG)
xyA162Hu 人嗅素4(OLFM4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4)
xyB271Hu 人IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor