获取电话大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)含量。
实验原理
大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)水平。用纯化的大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)，再与HRP标记的大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)ELISA试剂盒
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．大鼠氢离子转运ATP酶溶酶体辅助蛋白2(ATP6AP2)ELISA试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
xyA058Cp 羊白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)
xyA059Cp 羊白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A)
xyA060Cp 羊白介素13(IL13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 13 (IL13)
xyA061Cp 羊白介素15(IL15)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15)
xyA218Cp 羊转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2)
hircus; Caprine (Goat)
xyA064Cp 羊白介素18(IL18)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18)
xyA178Cp 羊α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)
hircus; Caprine (Goat)
xyA172Cp 羊血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Platelet Factor 4 (PF4)
xyA071Cp 羊白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a)
xyA072Cp 羊防御素β2(DEFβ2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2)
xyA076Cp 羊白介素3(IL3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 3 (IL3)
xyA077Cp 羊白介素4(IL4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4)
xyA078Cp 羊白介素5(IL5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5)
xyA079Cp 羊白介素6(IL6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6)
xyA080Cp 羊白介素8(IL8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8)
xyA085Cp 羊白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor (LIF)
(Goat)
xyA084Cp 羊瘦素(LEP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Leptin (LEP)
xyA274Cp 羊胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6
(IGFBP6) Capra hircus; Caprine (Goat)
xyA231Cp 羊尿皮质素1(UCN1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Urocortin 1 (UCN1)
xyA099Cp 羊基质金属蛋白酶13(MMP13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13)
Caprine (Goat)
xyA321Cp 羊半乳糖凝集素1(GAL1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Galectin 1 (GAL1)
xyA314Cp 羊半乳糖凝集素14(GAL14)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Galectin 14 (GAL14)
xyA296Cp 羊乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Lactoperoxidase (LPO)