大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。
实验原理
大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)水平。用纯化的大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE),再与HRP标记的大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠乙酰胆碱酯酶(AchE)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
Member 1 (WNT1)
xyR030Hu 人序列相似家族5成员C(FAM5C)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C)
xyD236Hu 人白三烯A4水解酶(LTA4H)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H)
xyD295Hu 人细胞色素P450家族成员1A1(CYP1A1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cytochrome P450 1A1 (CYP1A1)
xyD960Hu 人雌激素受体相关受体α(ERRα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Estrogen Related Receptor Alpha (ERRa)
xyC216Hu 人E1A结合蛋白P300(EP300)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300)
xyC078Hu 人层黏连蛋白α5(LAMα5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Laminin Alpha 5 (LAMa5)
xyC172Hu 人神经调节素2(NRG2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neuregulin 2 (NRG2)
xyD031Hu 人水通道蛋白8(AQP8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Aquaporin 8 (AQP8)
xyF979Hu 人双特异性磷酸酶9(DUSP9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9)
xyH552Hu 人神经源性分化蛋白6(NEUROD6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Neurogenic Differentiation 6 (NEUROD6)
xyC852Hu 人精胺氧化酶(SMOX)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Spermine Oxidase (SMOX)
xyN048Hu 人HtrA丝氨酸肽酶4(HTRA4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4)
xyE112Hu 人肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ephrin B2 (EFNB2)
xyE490Hu 人溶质载体家族30成员8(SLC30A8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 8 (SLC30A8)
xyC402Hu 人半胱氨酸丰富蛋白1(CRIP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cysteine Rich Protein 1, Intestinal (CRIP1)
xyC488Hu 人亚铁螯合酶(FECH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ferrochelatase (FECH)
xyM563Hu 人ⅣD组磷脂酶A2(PLA2G4D)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D)
xyC158Hu 人Ⅻ型胶原(COL12)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Collagen Type XII (COL12)
xyD105Hu 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related
Protein 6 (LRP6)
xyC913Hu 人成纤维细胞生长因子11(FGF11)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11)
xyC914Hu 人成纤维细胞生长因子12(FGF12)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 12 (FGF12)
xyH548Hu 人Nexn结合蛋白(NEXN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Nexilin (NEXN)
xyC268Hu 人11-β-羟基类固醇脱氢酶1(HSD11β1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1
(HSD11b1)
xyL178Hu 人G补缀FHA域血管生成因子1(AGGF1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiogenic Factor With G Patch And FHA Domains
1 (AGGF1)
xyC915Hu 人成纤维细胞生长因子13(FGF13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 13 (FGF13)
xyG831Hu 人肌醇加氧酶(MIOX)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Myo Inositol Oxygenase (MIOX)
xyE570Hu 人α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-1-B-Glycoprotein (a1BG)
xyD116Hu 人印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Indian (IHH)
xyC472Hu 人衰老关键蛋白1(FBLN1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibulin 1 (FBLN1)