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ELISA试剂盒试剂配制研究方法
ELISA试剂盒以含铁的磁性微粒作为ELISA固相载体，反应后用磁铁的吸引进行分离，洗涤利便，一般均配以特殊仪器。为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣，可应用如下的试验：用其他免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和阴性标本，将它们进行一系列稀释后，在不同的固相载体上按预定的ELISA操纵步骤进行测定，然后比较结果。
ELISA试剂盒载体的外形主要有三种：微量滴定板、小珠和小试管。良好的ELISA板应该是吸附机能好，空缺值低，孔底透明度高，ELISA试剂盒各板之间、统一板各孔之间、统一板各孔之间机能相近。再者，球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原决定簇或抗体结合位点的暴露面处于最佳反应状态，因此珠式ELISA的反应往往更为敏捷。IgG对聚苯乙烯等固相具有较强的吸附力，其联结多发生在Fc段上，抗体结合点暴露于外，因此抗体的包被一般均采用直接吸附法。
酶联免疫试剂盒操作步骤：
1.取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中。
2.分别标记样品编号，加入100μl的稀释样品于空白微孔中。
3.将酶标板置于37℃温育30分钟。
4.将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。
5.每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。
6.重复第5个步骤5次，在吸水纸上将酶标板拍干。
在ELISA试剂盒中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
1.固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
2.包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。
3.酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。
4.酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色
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