获取电话人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞培养的需要注意的一些问题,部分原因和解决方法
培养液pH值变化太快 | 可能原因 | 建议解决方法 |
1.CO2张力不对 | 按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度，2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。 | |
2.培养瓶盖拧得太紧 | 松开瓶盖1/4圈。 | |
3.NaHCO3缓冲系统缓冲力不足 | 改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓。 | |
4.培养液中盐浓度不正确 | 在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞液，在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。 | |
5.细菌、酵母或真菌污染 | 丢弃培养物，或用抗生素除菌。 | |
培养细胞死亡 | 可能原因 | 建议解决方法 |
1. 培养箱内无CO2 | 检测培养箱内CO2 | |
2. 培养箱内温度波动太大 | 检查培养箱内温度 | |
3. 细胞冻存或复苏过程中损伤 | 取新的保存细胞种 | |
4. 培养液渗透压不正确 | 检测培养液渗透压。注意：大多数哺乳动物细胞能耐受渗透压为260– 350 mOsm/kg。加入额外试剂如HEPES或药物都有可能影响培养液渗透压。 | |
5. 培养液种有毒代谢产物堆积 | 换入新鲜培养人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞液 |
细胞影响因素
1.细胞的表面积与体积之比以及细胞核与细胞质体积之间的平衡：细胞通过它的表面不断地与周围环境或邻近细胞进行物质交换，这么它就必须有足够的表面积，否则它的代谢作用就很难进行。但细胞的体积由于生长而逐渐增大时，表面积与体积的比例就会变得越来越小，物质交换适应不了细胞的需要，这可以引起细胞的分裂，以恢复适宜的比例。同样的，细胞核中的遗传信息指引和控制范围有限，细胞核对太大范围的细胞质的调控作用就会相对减少。
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