高转移人肝癌细胞

细胞培养基的基本成分

液体培养基保存：液体培养基应于4℃冰箱避光保存，实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12 个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良，可以再添加适量L-谷氨酰胺。

干粉培养基保存：高转移人肝癌细胞4℃冰箱避光保存，有效期36 个月。

血清：细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等，其中牛血清是最常用的血清，分为胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清，价格昂贵。新生小牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清，如厂家能做到这一点，新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。如小牛出生后已哺乳，从这种小牛中高转移人肝癌细胞取出的血清中可能含有较多的生物活性物质，其质量明显不如前两种。

血清的质量，种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长，而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同，尤其是对克隆细胞的生长，某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此，在购买大量血清之前，必须对血清支持细胞生长能力进行检测，然后再大量购买质量好的同一批号的血清，并注意以下几点：

（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1 个月。由于血清结冰时体积会增加约10％，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

（2）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。

（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

（4）热灭活是指56℃高转移人肝癌细胞, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中須規則搖晃均勻。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有：细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

（5）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。

（6）血清中的沉淀物

絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除，也可不用处理。高转移人肝癌细胞

显微镜下“小黑点”：经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。

HZA093Rb 兔巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) 

HZA277Rb 兔间隙连接蛋白43(CX43)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Connexin 43 (CX43) 

HZA284Rb 兔肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII) 

HZA304Rb 兔半乳糖凝集素4(GAL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 4 (GAL4) 

HZA295Rb 兔谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1) 

HZA010Rb 兔结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF) 

HZA013Rb 兔骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) 

HZA014Rb 兔骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) 

HZA021Rb 兔睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) 

HZA019Rb 兔白介素8受体α(IL8Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra) 

HZA235Rb 兔补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH) 

HZB472Rb 兔碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP) 

HZA485Rb 兔氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP) 

HZA527Rb 兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Oxidized Low Density Lipoprotein (OxLDL) 

HZA388Rb 兔补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 

HZA537Rb 兔神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Enolase, Neuron Specific (NSE) 

HZB908Rb 兔聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 

HZA011Rb 兔脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) 

HZB851Rb 兔血管内皮生长因子121(VEGF121)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor 121 (VEGF121) 

CEA005Rb 兔血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Angiotensin II (AngII) 

HZD232Rb 兔心肌肌钙蛋白T(TNNT2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2) 

HZA387Rb 兔补体成分3a(C3a)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 3a (C3a) 

HZA539Rb 兔髓鞘碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myelin Basic Protein (MBP) 

CEB216Rb 兔松弛肽(RLN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Relaxin (RLN) 

HZA886Rb 兔过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPARg) 

HZA073Rb 兔白介素2(IL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2)