痢疾志贺氏菌凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.痢疾志贺氏菌
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜痢疾志贺氏菌
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
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HZA570Hu 人Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Procollagen I C-Terminal Propeptide (PICP)
HZA571Hu 人Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type I (COL1)
HZB951Hu 人43kDa Tar DNA结合蛋白(TDP43)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tar DNA Binding Protein 43kDa (TDP43)
HZC011Hu 人补体因子B(CFB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)
HZC012Hu 人二氢嘧啶脱氢酶(DPYD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD)
HZC014Hu 人趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 6 (CCR6)
HZA193Hu 人纤维蛋白原(FG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibrinogen (FG)
HZA862Hu 人补体成分2(C2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 2 (C2)
HZA457Hu 人胱天蛋白酶14(CASP14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 14 (CASP14)
HZA468Hu 人衰变加速因子(DAF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Decay Accelerating Factor (DAF)
HZA471Hu 人骨钙素(OC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteocalcin (OC)
CEA472Hu 人降钙素(CT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Calcitonin (CT)
HZA473Hu 人C组着色性干皮病偶联因子(XPC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC)
HZA474Hu 人甲状旁腺素受体2(PTHR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2)
HZA475Hu 人维生素D受体(VDR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Vitamin D Receptor (VDR)
HZA478Hu 人心肌肌钙蛋白I(TNNI3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
HZA479Hu 人肌酸激酶MB同工酶(CKMB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB)
HZA480Hu 人肌红蛋白(MYO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myoglobin (MYO)
HZA483Hu 人内皮素转化酶1(ECE1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)
HZA484Hu 人氨基端前心钠肽(NT-ProANP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide (NT-ProANP)
HZA485Hu 人氨基端前脑钠素(NT-ProBNP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Terminal Pro Brain Natriuretic Peptide (NT-ProBNP)
CEA506Hu 人D-二聚体(D2D)ELISA试剂盒 ELISA Kit for D-Dimer (D2D)
HZA518Hu 人铁蛋白(FE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ferritin (FE)
CEA806Hu 人β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Beta-Endorphin (bEP)