啤酒酵母凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据啤酒酵母死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.啤酒酵母
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度啤酒酵母凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
啤酒酵母
hz-E13188 兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒 Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISAkit
hz-E13189 兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒 Rabbit nitric oxide synthase,NOS ELISAkit
hz-E13190 兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISAkit
hz-E13191 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISAkit
hz-E13192 兔尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒 Rabbit urokinase plasminogen activator,uPA ELISAkit
hz-E13193 兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISAkit
hz-E13194 兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒 Rabbit matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISAkit
hz-E13195 兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒 Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISAkit
hz-E13196 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒 Rabbit Platelet Factor 4,PF-4 ELISAkit
hz-E13197 兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒 Rabbit β-Thromboglobulin,β-TG ELISAkit
hz-E13198 兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 Rabbit neutrophil elastase,NE ELISAkit
hz-E13199 兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 Rabbit Complement fragment 3a,C3a ELISAkit
hz-E13200 兔子基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒 Rabbit matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISAkit
hz-E13201 兔子可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 differentiation 40 ligand,sCD40L ELISAkit
hz-E13202 兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试剂盒 Rabbit major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠ ELISAkit
hz-E13203 兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISAkit
hz-E13204 兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒 Rabbit B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISAkit