人大肠癌细胞 KM-12细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细人大肠癌细胞 KM-12细胞胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色人大肠癌细胞 KM-12细胞质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人大肠癌细胞 KM-12细胞
hz-E10773 人刀豆素A(ConA)ELISA试剂盒 Human concanavalin A,ConA ELISAkit
hz-E10774 人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒 Human Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISAkit
hz-E10775 人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 Human lipolysaccharide binding protein,LBP ELISAkit
hz-E10776 人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒 Human Glutathione peroxidase,GSH-Px ELISAkit
hz-E10777 人谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒 Human glutathione,GSH ELISAkit
hz-E10778 人17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒 Human 17-ketosteroids,17-KS ELISAkit
hz-E10779 人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISAkit
hz-E10780 人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒 Human Cathepsin K,cath-K ELISAkit
hz-E10781 人骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒 Human bone morphogenetic proteins,BMPs ELISAkit
hz-E10782 人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 Human Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISAkit
hz-E10783 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)ELISA试剂盒 Human proteolipid protein,PLP ELISAkit
hz-E10784 人垂草扁桃酸(VMA) ELISA试剂盒 Human vanillylmandelic acid,VMA ELISAkit
hz-E10785 人葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)ELISA试剂盒 Human glucokinase regulatory protein,GKRP ELISAkit
hz-E10786 人血凝素(HA)ELISA试剂盒 Human hemagglutinin,HA ELISAkit
hz-E10787 人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒 Human adipose differentiation-related protein,ADRP ELISAkit
hz-E10788 人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 Human Caldesmon,CALD ELISAkit
hz-E10789 人钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 Human calcineurin,CaN ELISAkit
hz-E10790 人骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒 Human CTX-2 ELISAkit
hz-E10791 人钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒 Human Calretinin,CR ELISAkit
hz-E10792 人骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒 Human Bone Morphogenetic Protein 6,BMP-6 ELISAkit
hz-E10793 人脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒 Human fatty acid-binding protein,FABP ELISAkit
hz-E10794 人腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA试剂盒 Human ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1 ELISAkit
hz-E10795 人羟脯氨酸糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒 Human Hydroxyproline-Rich Glycoprotein,HRGP ELISAkit
hz-E10796 人葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)ELISA试剂盒 Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISAkit
hz-E10797 人低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISAkit
hz-E10798 人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒 Human Arachidonic Acid,AA ELISAkit
hz-E10799 人骨涎蛋白(BSP)ELISA试剂盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISAkit