找不到产品？留下需求帮您找
一键询价
-
激光干涉仪型号： XL80 -
Hitachi日立CT15RE台式离心机型号： CT15RE -
Hitachi日立超速离心机CP70ME型号： CP70ME -
电热鼓风干燥箱型号： CS101-ABN -
Agilent 8890 气相色谱系统型号： 8890 GC -
全自动桌面溶出度测试系统RTJ3000+DS-3000型号： RT-J3000+DS3000 -
全自动溶出度测试仪RT-3型号： RT-3 -
流通池法溶出度测试仪DF-7型号： DF-7 -
自动桌面溶出度测试系统RT-J2000+DS2000α/DS3000型号： RT-J2000+DS2000α/DS3000 -
日立Primaide PLUS高效液相色谱仪型号： Primaide PLUS
获取电话让ELISA实验不失败的经验
ELISA检测系统是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在操作过程中总是会出现或大或小的问题，比如说花板、假阳性、全显色、信号值比空白还低等等。下面就由我抛砖引玉地来说一下，做的经验总结：
1、有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法扼要的列出如下：①亲和素生物素：先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②小分子必需依赖和大的蛋白小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒载体偶联后才能固定在固相载体上。包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。③脂类物质：可将其在有机溶剂（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质天然干固在固相表面。
2、应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下终极可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液，还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
3、但终极选用什么，要依据试验详细来实践。常用封锁剂有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲，从而排斥ELISA试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。封锁：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。
4、 在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有前提的用洗板机除外），洗的不彻底或串了孔，对如斯敏捷的ELISA系统可是不小的影响。由于聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。洗涤板：可以说在ELISA操纵中，洗涤是最主要的枢纽技术。
5、加抗体标本(和二抗)：注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。
6、显色：显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮钠。
7、每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA 试剂盒如出现问题也好分析。
HZA571Mu 小鼠Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type I (COL1)
HZA572Mu 小鼠Ⅱ型胶原(COL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type II (COL2)
HZA573Mu 小鼠Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Procollagen III N-Terminal Propeptide (PIIINP)
HZA604Mu 小鼠载脂蛋白A2(APOA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein A2 (APOA2)
HZA574Mu 小鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Laminin Alpha 1 (LAMa1)
HZA801Mu 小鼠碱性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)
CEA802Mu 小鼠胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholecystokinin (CCK)
CEA804Mu 小鼠胰高血糖素样肽1(GLP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 1 (GLP1)
HZA799Mu 小鼠骨成型蛋白7(BMP7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 7 (BMP7)
CEA839Mu 小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thyrotropin Releasing Hormone (TRH)
CEA843Mu 小鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH)
HZA993Mu 小鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tubulin Polymerization Promoting Protein (TPPP)
HZA855Mu 小鼠核因子κB受体激活因子配基(RANκL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANkL)
HZA372Mu 小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Gelsolin (GS)
HZA860Mu 小鼠上皮中性粒细胞激活肽78(ENA78)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)
HZA371Mu 小鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Gamma Induced Protein 10kDa (IP10)
HZA373Mu 小鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Desmin (Des)
HZB347Mu 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 1, Pituitary (ADCYAP1)
HZB867Mu 小鼠表皮生长因子受体2(EGFR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor 2 (EGFR2)
HZA684Mu 小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 5 Subtype B (MUC5B)
HZB980Mu 小鼠白介素33(IL33)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 33 (IL33)
CEB154Mu 小鼠纤维蛋白原α(FGα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibrinogen Alpha (FGa)
HZB897Mu 小鼠胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE)
HZA753Mu 小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4)
HZA663Mu 小鼠Toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2)
HZA295Mu 小鼠谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)