获取电话让ELISA实验不失败的经验
ELISA检测系统是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。可是在操作过程中总是会出现或大或小的问题，比如说花板、假阳性、全显色、信号值比空白还低等等。下面就由我抛砖引玉地来说一下，做的经验总结：
1、有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法扼要的列出如下：①亲和素生物素：先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法平均、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②小分子必需依赖和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保留抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。③脂类物质：可将其在有机溶小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒剂（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质天然干固在固相表面。
2、应留意以下原理：因为蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附长短特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时因为试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。详细的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下终极可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液，还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
3、但终极选用什么，要依据试验小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒详细来实践。常用封锁剂有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲，从而排斥ELISA试剂盒后的步骤中干扰物质的再吸附。封锁：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。
4、 在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有前提的用洗板机除外），洗的不彻底或串了孔，对如斯敏捷的ELISA系统可是不小的影响。由于聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。洗涤板：可以说在ELISA操纵中，洗涤是最主要的枢纽技术小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒。
5、加抗体标本(和二抗)：注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。
6、显色：显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮钠。
7、每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 试剂盒如出现问题也好分析。
NORs ELISAkit
hz-E10233人硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒Human Thioredoxin,Trx ELISAkit
hz-E10234人窖蛋白(Cav-1)ELISA试剂盒Human Caveolin-1,Cav-1 ELISAkit
hz-E10235人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒Human common acute lymphocytic leukaemia antigen,CALLA ELISAkit
hz-E10236人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒Human melanocyte stimulating hormone,MSH ELISAkit
hz-E10237人表皮角蛋白(EK)ELISA试剂盒Human epidermal keratin,EK ELISAkit
hz-E10238人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA试剂盒Human cytokeratin fragment antigen 21-1,CYFRA21-1 ELISAkit
hz-E10239人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒Human carbohydrate-deficient transferrin,CDT ELISAkit
hz-E10240人桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA试剂盒Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISAkit
hz-E10241人肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒Human CA724 ELISAkit
hz-E10242人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISAkit
hz-E10243人非小细胞肺癌抗原(LTA)ELISA试剂盒Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen,LTA ELISAkit
hz-E10244人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)ELISA试剂盒Human tumor marker DR-70 for lung cancer,DR-70TM ELISAkit
hz-E10245人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒Human fetal sulfoslycoprotein antigen,FSA ELISAkit
hz-E10246人本周蛋白(BJP) ELISA试剂盒Human Bence-Jones protein,BJP ELISAkit
hz-E10247人癌胚铁蛋白(CEF) ELISA试剂盒Human Carcinoembryonic Ferritin,CEF ELISAkit
hz-E10248人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)ELISA试剂盒Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg ELISAkit
hz-E10249人肿瘤特异性抗原(TSA) ELISA试剂盒Human tumor specific antigen,TSA ELISAkit
hz-E10250人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISAkit
hz-E10251人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA试剂盒Human breast cancer susceptibility protein 2,BRCA-2 ELISAkit
hz-E10252人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISAkit
hz-E10253人Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒Human Bcl-2 associated X protein, Bax ELISAkit
hz-E10254人转移因子(TF)ELISA试剂盒Human Transfer factor,TF ELISAkit
hz-E10255人结肠癌抗原(CCA)ELISA试剂盒Human Colon Cancer Antigen,CCA ELISAkit
hz-E10256人H-ras ELISA试剂盒Human H-ras ELISAkit
hz-E10257人c-sis ELISA试剂盒Human c-sis ELISAkit
hz-E10258人c-jun ELISA试剂盒Human c-jun ELISAkit
hz-E10259人c-fos ELISA试剂盒Human c-fos ELISAkit
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