一抗二抗去除液实验要点
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的异戊醇(苯酚—氯仿—异戊醇=25:24:1),异戊醇的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。一抗二抗去除液小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
一抗二抗去除液注意
1. 对大肠杆菌可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取质粒DNA。
2. 煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。
3. 提取的质粒DNA 中会含有RNA,但RNA 并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。
一抗二抗去除液其它产品信息:
xy-E11468 人主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA试剂盒
xy-E11469 人抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒
xy-E11470 人血栓前体蛋白(TpP)ELISA试剂盒
xy-E11471 人淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒
xy-E11472 人主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA试剂盒
xy-E11473 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA试剂盒
xy-E11474 人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒
xy-E11475 人载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒
xy-E11476 人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒
xy-E11477 人免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒
xy-E11478 人免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
xy-E11479 人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒
xy-E11480 人纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒
xy-E11481 人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒
xy-E11482 人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒
xy-E11483 人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒
xy-E11484 人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒
xy-E11485 人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒
xy-E11486 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒
xy-E11487 人组织因子(TF)ELISA试剂盒
xy-E11488 人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒
xy-E11489 人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒
xy-E11490 人淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)ELISA试剂盒