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本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中骨特异性碱性磷酸酶( BALP)活性。 ? 有效期:6个月 ? 保存条件:2-8℃ 使用目的 本试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中骨特异性碱性磷酸酶( BALP)的活性。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人骨特异性碱性磷酸酶( BALP)水平。用纯化的人骨特异性碱性磷酸酶( BALP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨特异性碱性磷酸酶( BALP),再与HRP标记的骨特异性碱性磷酸酶( BALP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨特异性碱性磷酸酶( BALP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人骨特异性碱性磷酸酶( BALP)浓度。 注意事项 ? 本试剂盒仅用于科研,不得用于医学诊断。 ? 使用试剂盒前,请仔细阅读说明书,以试剂盒内的说明书为准,请务必理解说明书内容。 ? 酶标包被板属于可拆型,开封后如未用完,板条应装入铝箔袋密封并2-8°C保存。 ? 加样样本和试剂应尽快完成。 ? 避免实验过程中酶标板干燥;清洗后尽快加试剂。 ? 实验开始,所有试剂应平衡到室温 (21-26°C) 后方可进行。温度会影响吸光度值,但不影响样本值。 ? 切忌用口加样,以免试剂和样本粘到皮肤和粘膜上。 ? 不要在处理样本或试剂的区域抽烟、吃东西、喝酒或化妆。 ? 操作时带一次性手套,微生物的污染会影响实验结果的正确性。 ? 操作应按照国家规定的安全条列进行。 ? 过期的试剂盒切勿再使用。 ? TMB 底物对皮肤有刺激性,不慎入眼,立即用大量水冲洗,皮肤上不慎接触到也应立即用肥皂,并用大量的水冲洗。试验中被污染的物品在下次使用前应尽快清洗。 试剂盒组成 1.说明书 1份 2.封板膜 2张 3.酶标包被板 12孔×8条 4.标准 1600 U/L 0.6ml×1 瓶 5.标准品稀释液 2ml×1 瓶 6.生物素标记的抗BALP抗体 1.5ml×1瓶 7.显色剂A液 6ml×1瓶 8.显色剂B液 6ml×1瓶 9.终止液 6ml×1瓶 10.酶标试剂 6ml×1瓶 11. 20倍浓缩洗涤液 30ml×1瓶 需要而未提供的试剂和器材 ? 吸光度值在450nm波长下检测的酶标仪。 ? 1-2ml的加样器。 ? 100 ml和1L的量筒。 ? 吸水纸。 ? 37°C 恒温箱。 ? 蒸馏水或去离子水。 ? 数据分析和绘图软件,图纸。 ? 标准和样品稀释的试管。 储存条件 ? 有效期内的试剂如开封后未用完,请2-8°C 保存。 ? 过期的试剂请不要用,打开后的试剂2-8°C 保存。 ? 酶标包被板必须2-8°C 保存,如有未用完的酶标包被板,打开的铝箔袋须密封并2-8°C 保存。 ? 开封后的试剂盒2-8°C只能保存8周。 试剂准备 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 样本处理及要求 1. 血清-用采血管收集血液,室温血液自然凝固30分钟,1000 xg离心15分钟左右,收集上清,尽早进行实验,或者分装后-20°C 或 -80°C 保存。 2. 血浆-收集好的血浆根据要求选择EDTA或者肝素作为抗凝剂,2-8°C 1000 xg离心15分钟左右,30分钟内收集好,-20°C 或 -80°C 保存,避免反复冻融。 3. 细胞上清及相关液体-收集好的样本离心后应尽快实验,或者分装后-20°C 或 -80°C 保存,避免反复冻融。 操作步骤 ? 注意事项 ? 所有试剂和样本使用前必须在室温下平衡,混匀试剂时不应起泡沫。 ? 一旦实验开始,各操作步骤都应尽快完成。 ? 避免重复使用手中的吸头和试管,以免交叉污染。 ? 一般情况,酶的反应与时间和温度