用途为高灭蚊活性的：苏云金芽孢杆菌以色列亚种

                 用途为高灭蚊活性的：苏云金芽孢杆菌以色列亚种

苏云金芽孢杆菌以色列亚种是Bacillus属的微生物，原产地为以色列。主要用途为研究；分析检测；生产，具体用途为高灭蚊活性。

一、菌种简介

平台编号：Bio-34089

规格：培养物

拉丁属名：Bacillus Thuringiensis Subsp. Inraelensis De

中文名称：苏云金芽孢杆菌以色列亚种

拉丁属名：Bacillus

种名加词：thuringiensis subsp. inraelensis de Barjac

收藏时间*：2003-8-10

来源历史：中国林科院森环森保所

原产国：以色列

资源归类编码：15131311101

模式菌株：模式菌株

主要用途：研究；教学

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基信息：培养基编号: 2 培养基名称: 营养肉汁琼脂

培养温度：30

资源保护类型：培养物

保藏方法：真空冷冻干燥法；定期移植法

共享方式：公益性共享

提供形式：斜面培养物

实物状态：有实物

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征

苏云金芽孢杆菌以色列亚种，杆状、G+、在芽胞囊形成期形成椭圆形芽胞及伴胞晶体，好氧，中温，生化反应与蜡状芽胞杆菌大同小异，主要依据H血清学反应分血清亚种。兼性嫌气菌;在pH6的营养琼脂上生长；在含7%NaCl(W/V)的肉汤中生长；在含KCN的Brown培养基中生长；在柠檬酸培养基中不生长；在嫌气肉汤+葡萄。

三、菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。

6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

四、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、保存方法

1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。

2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

3、悬液保存法：

① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

4、载体保存法：①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。

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