微生物的有效培养对生物技术、制药、医疗、食品安全和替代性能源等行业至关重要,而为微生物的生长创造合适的环境是微生物培养的关键。通常用于厌氧微生物培养环境创建的方法有三种:手套箱、厌氧产气袋和自动化罐培养系统,如安达望的 Anoxomat III 微生物培养系统。相比较而言,自动化罐培养系统运行成本低,操作灵活高效,且在微生物培养过程中能够获得更高的恢复率。
用
户
评
价
来自哈肯萨克医疗中心的弗兰克·霍利斯提到:Anoxomat 操作简单,在一年的运营中,仅气体成本一项就节省了大约 8000 美元(相较于手套箱)。
Anoxomat III 还能够配合符合人体工程学的罐子使用,这些罐子具有透明的便于观察培养皿的盖子和全新设计的提高培养罐密封性的夹具。下面降通过实验来研究对比不同培养系统/培养罐的性能,即符合人体工程学的培养罐(AJ9049 和 AJ9050),标准培养罐 (AJ9025) 和 BD 的 BBL GasPak 100 培养罐。
实验研究
培养环境:
选择有代表性的微生物分别在厌氧、微需氧和嗜二氧化碳的环境中培养。表 1 列出了培养环境、用于培养的微生物和平板类型等信息。
培养环境 | 培养的微生物 | 平板类型 | |
厌氧 | 氧气含量≤0.2%或达到可检测水平 | Bacteroides fragilis | Columbia Agar |
微需氧 | ~ 6%含氧量 | Bacteroides fragilis | Chocolate II Agar |
嗜二氧化碳 | > 5%的二氧化碳 | Neisseria gonorrhoeae | Chocolate II Agar |
表 1:培养环境信息
培养罐类型:
本次研究采用了四种不同类型的培养罐,分别对三种微生物进行了培养,表 2 对本次研究采用的 15 个培养罐进行了详细说明。
培养罐类型 | 安达望货号 | 可容纳板子数量 | 平行实验培养罐数量 | 培养系统 |
符合人体工程学Anoxoma培养罐 | AJ9049 | 12块板 | 5 | Anoxomat III |
符合人体工程学Anoxoma培养罐 | AJ9050 | 24块板 | 5 | Anoxomat III |
Anoxomat标准罐 | AJ9025 | 12块板 | 2 | Anoxomat III |
BD GasPak 100 | 非安达望产品 | 12块板 | 3 | BD GasPak厌氧反应袋 |
表 2:培养罐的类型
罐培养环境分析:
所有 Anoxomat 培养罐均使用 Anoxomat III 逐一产生相应的培养环境。GasPak 100 使用不同的 GasPak 厌氧产气袋产生所需的培养环境。所有罐内的培养环境均使用 OxySense®325i 光学氧分析仪进行氧浓度的测定。
研究方案:
将符合人体工学罐中培养细菌的平均菌落大小(以毫米为单位)与标准培养罐和 GasPak 100 培养罐种细菌的平均菌落大小进行比较。
在实验过程中,每种类型培养罐的细菌孵育时间相同。阴性对照板与测试板一起孵育,以确保每个罐子中的气体成分是符合要求。表 3 总结了研究方案。
培养环境 | 培养的微生物 | 板子数量 | |||
符合人体工程学的12板培养罐(AJ9049) | 符合人体工程学的24板培养罐(AJ9050) | 标准12板培养罐(AJ9025) | GasPak 100培养罐 | ||
厌氧 | B. fragilis | 9 | 18 | 9 | 9 |
M. luteus (对照组) | 3 | 6 | 3 | 3 | |
微需氧 | C. fetus | 9 | 18 | 9 | 9 |
B. fragilis (对照组) | 3 | 6 | 3 | 3 | |
嗜二氧化碳 | N. gonorrhoeae | 9 | 18 | 9 | 9 |
B. fragilis (对照组) | 3 | 6 | 3 | 3 |
表 3:细菌培养的实验方案
数据分析
每个培养板上选择三到五个孤立的菌落,采用数字卡尺测量每个菌落的直径,直径以毫米为单位进行记录。氧浓度的测量在每个培养罐放置到培养箱孵育之前进行。
使用 Minitab® 软件生成统计数据和图表,置信区间为 95%。
结果
厌氧条件培养:
在培养 B. fragilis 时,所有 Anoxomat 罐(AJ9049、AJ9050 和 AJ9025)的菌落平均直径分别比 GasPak 100 培养罐的大 0.29 mm、0.11 mm 和 0.22 mm。
符合人体工程学的 12 板培养罐产生的菌落平均直径比标准 12 板培养罐的菌落平均直径大 0.07 mm。然而,符合人体工程学的 24 板培养罐产生的菌落平均直径低于标准 12 板培养罐(小 0.11 mm)。符合人体工程学的罐子之间的差异可能是由于罐子体积的差异引起的。结果如图 4 所示。
图 4:厌氧培养不同培养罐中菌落大小比较
微需氧条件培养:
在培养 C. fetus 时,所有 Anoxomat 罐(AJ9049、AJ9050 和 AJ9025)的平菌落均直径分别比 GasPak 100 培养罐大 0.34 mm、0.15 mm 和 0.26 mm。
人体工程学 12 板培养罐产生的平均菌落直径比标准 12 板培养罐大 0.08 mm。然而,符合人体工程学的 24 板培养罐产生的平均直径低于标准的 12 板培养罐(小 0.11 mm)。人体工程学罐子之间的差异可能是由罐子体积的差异引起的。参见图 5。
图 5:微需氧培养条件下,菌落直径的比较
嗜二氧化碳条件培养:
当培养 N. gonorrhoeae 时,所有培养罐的菌落大小彼此相当(所有观察到的差异都在 0.01 mm 以内)。参见图 6。
图 6:嗜二氧化碳培养条件的菌落直径比较
结论
在所有 3 种不同培养条件/细菌测试中,符合人体工程学的罐子产生的菌落平均相当于或优于标准培养罐和 GasPak 100 培养罐。
在厌氧和微需氧培养条件下,24 板人体工程学培养罐的菌落平均直径略低于 12 板标准培养罐。这种菌落平均直径的差异可能是由于罐子体积的差异引起的。
长按或扫描上方二维码关注我们
Advanced Instruments成立于1955年,总部位于美国马萨诸塞州诺伍德,60 多年来一直致力于帮助生物制药,临床及食品饮料行业客户提升测试结果的质量,实现可信赖的实验结果,并不断提高企业的生产效率。
安达望(上海)科技有限公司是Advanced Instruments在中国依法成立的全资子公司。
更多
如何进行细胞疗法的制剂配方和冷冻保护剂的渗透压检测?
厂商
2024.08.15
InstiGRO CHO PLUS 促单细胞成活添加剂增强型- 一招制胜!
厂商
2024.08.15
InstiGRO CHO + CD FortiCHO,同样优秀!
厂商
2024.08.15
渗透压检测能力大PK,OsmoTECH XT很Power!
厂商
2024.08.15