为什么会出现鬼峰？

鬼峰是液相色谱中较常出现的问题之一，导致鬼峰出现的因素有很多，在使用液相色谱仪时任何不当的操作都可能会产生鬼峰，从而影响分析结果的准确性。根据鬼峰出现的频率判断，产生鬼峰的主要因素有溶剂问题，仪器问题、流动相残留气泡以及操作不当等。

  一、溶剂问题

  1.有机溶剂

  甲醇制备工艺相较乙腈的制备工艺来说较为简单，其杂质含量也较少。但甲醇紫外吸收范围比乙腈广，当使用紫外检测器尤其波长较低时，用甲醇做有机相会导致漂移太大产生问题。而用作梯度色谱的乙腈质量要求较高，采用进口梯度色谱专用乙腈能够很好的减少鬼峰的出现。而且如果有机相使用完后未更换新的流动相瓶，直接添加补充到旧的流动相瓶也有可能会产出鬼峰。

  2.水

  要保证水的“干净”，避免水中含有较多的杂质，尽量用HPLC级的纯水并且水相要现配现用，避免微生物滋长。

  3.其它试剂

  缓冲盐、TFA、EDTA等试剂也会对流动相造成很大的影响，尽量用纯度高的试剂配制流动相。

  二、仪器问题

  1.液相的流动相管路被污染

  长时间使用含水量较高的流动相(尤其是加入了缓冲盐)，细菌很容易在管路中滋生，细菌产生的代谢产物或是细胞碎片会造成鬼峰出现。

  2.检测器样品残留

  一些样品组分在检测器流通池内残留，从而产生鬼峰的情况，这种情形，需要对流通池进行彻底清洗。

  3.单向阀堵塞

  由于单向阀堵塞而造成系统压力不稳，从而产生鬼峰。

  4.色谱柱中组分残留

  色谱柱可对流动相或系统流路内的强保留污染组分起到富集作用，在有机相比例随梯度程序变化的过程中而被冲洗出来，污染组分残留会导致鬼峰的出现。

  三、流动相残留气泡

  这种情况下可将流动相超声或鼓He脱除气泡并打开purge阀，大流速冲出仪器管路中的气泡，来减少气泡引起的鬼峰现象。

  四、操作问题

  1.流动相配置过程中受到污染

  主要是盛放流动相的容器或是样品瓶受到污染。这种污染可能来自于洗涤剂、铬酸洗液或是其他实验人员用完后的残留杂质。有时流动相容器的塑料盖碎片都有可能是杂质的来源。对于样品瓶污染情况下的鬼峰，容易排除，仅需要分别将样品溶解或稀释用的试剂以及进样小瓶更换，即可确定鬼峰的来源。

  2.样品稀释液与流动相极性或者pH相差太大

  这也是导致鬼峰的原因之一，这种问题很有可能导致样品分为两个不同的阶段出峰，从而产生双峰或者多峰。

  讨论到这里，大家可以看到鬼峰的来源多种多样的，除了避免实验操作错误、溶剂和仪器错误导致鬼峰出现，使用鬼峰捕集柱能较大减少鬼峰的出现。鬼峰捕集去除柱也称鬼峰小柱，将鬼峰捕集柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。柱芯容积约700μL，耐压>35Mpa，有多种尺寸、规格可供选择。