疫情居家？聊聊哈佛大学的新冠病毒研究案例

今天是小编居家的第66天，今天不聊疫情，聊聊病毒。本次疫情爆发的原点是奥密克戎突变株BA2，相比早期的病毒，本次突变体具有隐匿性高，传染性强等特点。新病原体及其突变株的出现对抗击传染性疾病的新疫苗和新疗法研发提出更严峻的考验。疫情就是命令，时间就是生命。高通量流式细胞分析技术可高效助力药物和疫苗研发人员，加速病毒生物学和宿主免疫反应表征等研究的工作流程。

接下来，小编带您回顾两个典型研究案例，一起了解iQue®高通量流式细胞仪在病毒学研究中发挥的独特作用吧！

COVID-19席卷全球伊始在世界各地传播速度非常之快，这也使得有效的SARS COV-2疫苗和治疗剂成为全球健康的迫切需要。作为一种新出现的病原体，必须对该病毒的各方面都进行研究，包括了解其体液免疫应答以及快速出现的传染性增强的变种。

来自哈佛大学医学院的Mercado等人[1]使用iQue®对中和抗体滴度进行定量，并对编码全长稳定SARS-CoV-2棘突蛋白复制能力不强的重组腺病毒载体的免疫细胞功能进行深入的研究。研究人员开发出了一系列可编码SARS-CoV-2棘突蛋白不同变体的载体，并对它们的免疫原性和保护效果做了评估。也对抗体依赖性中性粒细胞吞噬作用（ADNP）、细胞吞噬作用（ADCP）、补体沉积（ADCD）以及自然杀伤激活（ADNKA）分析等效应子功能进行了研究。2021年2月，强生公司获得美国食品药品监督管理局（FDA）对Ad26.COV2.S疫苗的紧急使用授权。

(A) 本文展示了一种基于iQue®高通量流式细胞仪的快速定量ADCP分析设计及工作流，用以研究抗体开发领域的作用机制。可以测试候选抗体结合经过精心改造以显示病原体抗原的靶细胞的能力。然后，该分析以高通量和多参数的方式为单核细胞的吞噬作用提供荧光读数，并报告细胞活性，并且可以对其他感兴趣的分泌蛋白（如细胞因子或效应蛋白）进行多重读数。(B) iQue®的简化工作流程只需最少的清洗步骤，即可实现快速分析设置、采集和集成数据分析。

在开发疫苗的同时，研究人员基于COVID-19患者的不同临床轨迹，探索了构成这些轨迹的免疫机制和血清学特征。来自哈佛大学的Atyeo等人[2]使用iQue®高通量流式细胞分析平台评估患者血浆样本中的抗原特异性抗体亚类、同型、唾液酸、半乳糖及Fcγ受体结合水平。还使用该平台对血浆样本进行功能分析，以便对ADCP、ADNP、ADCD和ADNKA定量。作者在结果不同的个体中观察到了不同的抗体特征。可以看出，庞大的数据量的背后，必须有一套完整的数据采集、筛选及分析工具辅助科学家很好地完成工作。iQue Forecyt®软件可以在数分钟内快速从采集转变到分析，平台与之相结合之后，无需进行数据外推和导出，即可轻松将数据可视化并快速进行解释，对于复杂的生物分析也是如此。

Summary

以上研究证明，使用多功能iQue®可以提高通量，简化数据分析，应用于各种多重检测分析中，包括抗体同型、中和及功能研究，以及数据分析与作图。

iQue®高通量流式细胞术平台旨在不降低先进分析能力的前提下简化蛋白分析、免疫表型、功能评估和分析，包括抗体筛选及免疫细胞激活。可以在单个多重分析中，使用每孔低至1-2 μL的样品同时测定表型变化、增殖率及分泌因子等细胞特异性参数，从而获得更加深入的生物学结果。

iQue®采用获得专利的采样方法，可达到业内最快的样本采集速度。该平台还可以快速处理多个检测培养板的数据，兼容96、384或1536孔板配置，并可连接任何自动化系统，连续加载孔板。

鉴于这种独特的取样方法只使用几微升的样品，所以，研究人员可以保存检测试剂和宝贵的患者来源样品，同时保留材料，以供进一步的下游表征研究使用。


应用亮点

-参考文献-

Mercado NB, Zahn R, Wegmann F, et al. Single-shot Ad26 vaccine protects against SARS-CoV2 in rhesus monkeys. Nature. 2020;586(7830):583-588. doi: 10.1038/s41586- 020-2607-z.

Atyeo C, Fischinger S, Zohar T, et al. Distinct early serological signatures track with SARS-CoV-2 survival. Immunity. 2020; 53(3):524-532.e4. doi: 10.1016/j. immuni.2020.07.020.