【精彩集锦】第四届PCR技术网络大会视频回放出炉！

　　发展近30年，PCR技术已成为分子实验室最常规的实验手段。《纽约时报》曾高度评价该技术“高度创新，非常重要”。如今，随着技术发展，PCR不只被应用于生命科学研究，还广泛用于临床诊断、药物分析、食品安全、法医鉴定和疾控等领域中。

　　2020年4月16日—17日，由仪器信息网举办的第四届PCR技术网络大会成功召开。本次大会为期2天，共吸引近1300名网友参会。24位PCR技术研发与应用专家分别在“新仪器与新技术”、“病原体核酸检测”、“分子生物学研究”、“精准医疗”4个主题下作了精彩的报告分享，以下是部分视频回放内容。

　　“新仪器与新技术”专场

本专场报告嘉宾

　　方群(浙江大学)，报告主题《基于微流控液滴技术的自动化PCR分析系统》

　　本报告介绍了作者研究组基于具有自主知识产权的序控液滴阵列(Sequential Operation Droplet Array, SODA)技术所发展的多种自动化核酸分析系统，包括可实现单细胞捕获、细胞裂解、RNA逆转录、PCR扩增、荧光检测等操作的单细胞MicroRNA RT-PCR分析系统、多体积数字PCR绝对定量分析系统，以及可自动完成核酸提取、逆转录、PCR扩增、荧光检测的集成化、低成本RT-PCR分析系统。

　　鲁书林(Fluidigm)，报告主题《聚焦COVID-19，Fluidigm微流控技术在流行病学研究中的应用》

　　Fluidigm独有的微流控芯片技术, 全封闭独立的qPCR反应仓特点使得多样本、多目标的自动化快速检测成为可能，能够在较短时间内准确甄别致病病原体、相似症状的病原体差异等，助力公共卫生系统迅速建立有效预警方案，尽早阻止疫情的蔓延。同时系统配套的实时dPCR微流控芯片可以对低病毒载量样本进行准确定量，提高检测灵敏度。另外，系统还可实现NGS文库制备功能，自动化构建病原菌NGS文库。Fluidigm高通量、多功能微流控技术带来以极小量样本获得大数据的优势，特别适合用有限的病人样本研究病毒毒力因子导致的复杂的宿主免疫系统变化，有助于明确新型冠状病毒的致病机理，鉴别出易感人群的特征。

　　陆瑶(中科院大连化物所)，报告主题《基于微流控芯片的单细胞分泌谱集成化分析》

　　细胞是生命存在的基础，探索生命健康与疾病常需要以细胞研究为基础。由于细胞与细胞之间存在差异，群体细胞研究得到的平均结果往往会掩盖个体差异信息。为更全面的了解细胞以服务人类健康、疾病研究，单细胞分析就变得尤为必要。在过去的几年中，我们开发了一系列的基于微流控芯片的高通量、高内涵单细胞细胞分泌分析工具，大大加深了人们对细胞分泌异质性的认识，并有可能应用于临床实现个体化、精准医疗。

　　杜文斌(中科院微生物所)，报告主题《基于界面振动微滴阵列技术的数字PCR系统》

　　PCR仪是一种精密分子检测仪器。作为第三代绝对定量PCR技术，数字PCR仪的微流控单元设计是主要难点。杜文斌团队提出了一种新的界面振动液滴制备技术，建立了无芯片的数字PCR液体工作站模式，简化了实验操作，大大降低数字PCR使用成本。报告将介绍杜老师自主研发的自动化数字PCR系统的特点及初步应用情况。

　　王怀舟(小海龟科技)，报告主题《数字PCR技术发展动态及应用新场景》

　　数字PCR是近年来迅速发展起来的一种定量分析技术。其特点是结果判定不依赖于扩增曲线的循环阈值(Ct)、不受扩增效率影响、良好的准确度和重现性，并且可实现绝对定量分析。数字PCR已经在科研、临床等领域显示出巨大的技术优势和应用前景。本报告主要介绍dPCR基本原理、主流商业化dPCR平台特点及演变趋势、应用新场景。

　“病原体核酸检测”专场　　

本场报告嘉宾

　　张选(锐讯生物)，报告主题《锐讯数字PCR解决方案助力抗击新型冠状病毒疫情》

　　陈力(复旦大学)，报告主题《ddPCR for infections 疫与病中的数字PCR》

　　新冠病毒是对人类及个体的重大危害。如何利用我们手上的检测手段，去有效的应对这一时艰，是大家的共同挑战和关注。数字PCR技术，具有可定量对比，样本处理简便等技术特点，为我们提供了一种新的技术手段。讲座的主要内容，是数字PCR的发展现状及应用实例。

　　刘家云(空军军医大学)，报告主题《新型冠状病毒核酸检测及质量控制》

　　董莲华(中国计量科学研究院)，报告主题《数字PCR在新型冠状病毒核酸检测中的应用》

　　王俊果(赛默飞)，报告主题《致病微生物定量PCR多重检测技术应用进展及新平台介绍》

　　曾静(北京海关)，报告主题《抗击新冠肺炎-2019 海关在行动》

　　彭小薇(中国兽医药品监察所)，报告主题《PCR技术在动物布鲁氏菌病中的诊断应用》

　　布鲁氏菌病是一种危害严重的人兽共患病。尽管血清学诊断方法是动物布鲁氏菌病诊断的主要方法，但是其存在无法区别感染抗体与免疫抗体，且与部分细菌存在交叉反应。PCR类诊断方法是我国现行标准和OIE推荐的布鲁氏菌病诊断方法。在报告中主要对国内外相关标准中推荐的多重PCR、套式PCR、及本实验室建立的荧光定量PCR和数字PCR技术进行介绍，同时对布鲁氏菌病PCR检测中相关问题进行探讨。

　　Chenyu Li(Paragon　Genomics)，报告主题《快速简易的全序列新冠病毒测序及新病源体发现》

　　“分子生物学研究”专场

本场报告专家

　　伊鸣(北京大学)，报告主题《删除记忆——功能特异性神经元亚群基因编辑技术》

　　哺乳动物脑有不同形态、功能和遗传特征的神经元，构成复杂的神经网络，介导不同的生理、病理表型。解析脑的高级认知功能，离不开特定神经环路和特定神经元的基因操控。我们将基于CRISPR的基因编辑技术与功能特异性神经元标记技术结合应用，在鼠脑中实现特定记忆的精确删除，为解析脑的高级认知功能提供了有力的研究技术。

　　东秀珠(中科院微生物所)，报告主题《高通量测序及宏基因组分析揭示环境丰富的未培养微生物及潜在功能》

　　自Woese建立小亚基rRNA的生物发育系统以来，利用该marker发现环境中多样性丰富的未培养微生物。最近发展的宏基因组技术可获得对环境基因的认识及未培养微生物的功能，对获得这些功能微生物物种提供了指导。本报告将介绍基于PCR扩增及宏基因组装基因组认识未培养微生物的功能，并在此基础上获得微生物物种及其应用的研究过程。

　　詹显全(中南大学湘雅医院)，报告主题《基于多组学的卵巢癌能量代谢及其分子标志物的研究》

　　林俊生(国立华侨大学)，报告主题《PCR助力适配体的制备和应用》

　　本部分介绍了从单一序列(并非文库!)通过诱变PCR制备aptamer(适配体)以及结合PCR与aptamer的双重特异性，利用PCR扩增信号的优势，高敏检测靶标蛋白质。

　　娄新徽(首都师范大学)，报告主题《PCR技术在核酸适配体体外筛选技术中的应用及其存在的问题》

　　核酸适配体是一类能够特异性识别多种类型靶标的短链核酸(DNA或者RNA)，通过被称为SELEX的体外筛选技术，由化学合成的随机核酸文库经过多轮的亲和富集获得。PCR技术是SELEX的重要技术步骤，对不同序列DNA的扩增偏好性、扩增的特异性和效率直接影响核酸适配体筛选的成败。实时定量PCR技术是核酸适配体的筛选进程监控的高灵敏技术手段。

　“精准医疗”专场　　

本场报告嘉宾

　　马勇(苏州医工所)，报告主题《高灵敏度、高特异性定量PCR技术在癌症早期筛查领域的应用》

　　赵云(伯乐生命医学)，报告主题《Droplet Digital PCR and Application to Novel Tumor Therapy》

　　微滴式数字PCR(ddPCR)技术凭借无需参照的绝对定量能力和识别微小含量变化的分辨率，以及更高的检测灵敏度在肿瘤液体活检领域得到更大范围的应用。随着肿瘤精准医疗成为共识，ddPCR对于肿瘤标志物的检验，能为肿瘤新疗法继续提供支持。

　　郭建巍(北京市第一中西医结合医院)，报告主题《新冠病毒核酸检测临床应用若干问题及思考》

　　荧光定量PCR技术应用于临床已经有二十多年时间，在感染性疾病的诊断和临床疗效评估中发挥了非常重要的作用。本次授课主要从新冠病毒核酸检测、EB病毒核酸检测及结核的分子检测入手，探讨了分子诊断在临床应用中面临的问题及遇到的挑战。

　　朱咪咪(厚泽生物)，报告主题《Qsep系列全自动核酸蛋白分析系统在测序质控和分子生物学中的应用》

　　Qsep系列全自动毛细管电泳仪，可对任何DNA和RNA片段进行分子大小分析，此系列设备通量灵活，具备高灵敏度和高分辨率的特性，可用于gDNA和总RNA质量分析、二代三代测序文库质控、普通和多重PCR产物分析、CRISPR基因编辑检测、SSR分子标记开发，各种小RNA或者引物短片段检测，以及蛋白样本电泳等等应用。

　　付应洁(罗氏诊断)，报告主题《生物制药生产过程中的宿主细胞DNA残留检测》

　　崔巍(中国医学科学院肿瘤医院)，报告主题《化疗药物相关的基因靶点检测及解析》

　　本讲座针对常见的化疗药物相关的基因靶点进行解析。肿瘤药物的疗效和副作用离不开基因编码的酶的参与，基因的多态性对肿瘤化疗药物的疗效和毒副作用具有一定的影响，从遗传代谢角度可预测化疗药物对某个特定患者可能产生的疗效和毒副作用的风险，这对临床针对患者进行个性化用药具有指导作用。

第四届PCR技术网络大会视频回放合集