安捷伦1260 Infinity液相色谱/6410液质联用，助力面膜检测

2017年，国家食品药品监督管理总局在全国范围内组织抽检了面膜类化妆品3727批次，抽样检验项目合格样品3704批次，不合格样品23批次。不合格项目为检出含有氯倍他索丙酸酯、倍他米松戊酸酯、氟轻松、倍他米松、地塞米松等糖皮质激素物质。

糖皮质激素 (glucocorticoids) 是一类甾体激素。目前，这类本该严禁使用的药物正被违法滥用于化妆品中，作为细嫩美白肌肤的功效成分，其会破坏人体激素平衡，导致多种疾病发生。本研究针对化妆品中可能使用的 41 种激素品种进行多成分同时测定，满足对这类宽范围、多组分、复杂基质样品高通量检测的需求。

长期使用含有糖皮质激素类的化妆品可能导致面部皮肤产生黑斑、萎缩变薄等问题，还可能出现激素依赖性皮炎等后果，《化妆品安全技术规范》（2015年版）规定其为化妆品中禁用物质。

国标GBT 24800.2的方法指导中采用的是LC-MS/MS和薄层色谱法。

标准中液相色谱/串联质谱测定方法适用于化妆品中糖皮质激素的定量测定，其检出限为0.03μg/g，定量限为0.1μg/g。薄层层析法适用于化妆品中糖皮质激素的定性筛选。点样量为10mg时，其检出限为50μg/g。点样量为20mg时，其检出限为25μg/g。

针对该国标，安捷伦制定了相关应用方案。

化合物基本信息

糖皮质激素基本信息

实验部分

样品前处理

称取 0.2 g 样品，加入 3 mL 饱和食盐水和 2 mL 乙腈（2 次）涡旋提取目标物。合并二次提取的 4 mL 乙腈，加入 40 mL 水、0.2 mL亚铁氰化钾、0.2 mL 醋酸锌，混匀后 5000 rpm 离心 10 min。上清液倒入 Bond Elut Plexa 聚合物小柱 60 mg/3 mL（上接 50 mL磨口漏斗），按固相萃取净化过程获得液质上机液

固相萃取净化操作流程图

色谱和质谱条件

仪器： Agilent 1260 Infinity 液相色谱/6410 三重四极杆液质联用系统

色谱柱： Agilent ZORBAX SB-C18，2.1 × 50 mm，1.8 -m，

部件号 827700-902

进样量：2 -L

流动相： A) 含 0.1% 乙酸的水溶液

B) 含 0.1% 乙酸的乙腈溶液

梯度洗脱：时间/min %B

0    32

3.0     32

12.0    75

14.0    75

14.1    32

流速：0.3 mL/min

柱温：30 °C

分离时间：16 min

离子源：ESI

干燥气流量：5 L/min

干燥气温度：350 °C

雾化器压力：38 psi

化妆品中 41 种糖皮质激素类药物的色谱图

化妆品中 41 种糖皮质激素类药物的回收率和精密度

结论

化妆品剂型多样、基质复杂，所涉及的 41 种糖皮质激素的药效从弱效、中效、强效到超强效，分子特征为 17 碳原子环戊烷并多氢菲母核上具有不同基团的修饰，差异较大。从化妆品中完整提取并纯化出数十种待测目标物，并进一步建立多组分色谱分离、质测定仍有很多困难。因此，好的样品前处理方法非常关键。本文中使用的 Bond Elut Plexa 小柱，具有纯化效果好、回收率高、流速快的特点，可以很好的用在大批量样品检测中，可作为化妆品中 41 种糖皮质激素检测的参考方法。