DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的测定解决方案

    目前检测黄曲霉毒素主要有薄层色谱法 ( TLC )、免疫亲和柱-高效液相色谱法( HPLC- FL)、酶联免疫法( ELISA)、免疫亲和柱-高效液相色谱法串联质谱法等，薄层色谱法和酶联免疫法主要应用黄曲霉毒素的定性，不能准确定量，免疫亲和柱-液相色谱法和液相色谱法-串联质谱能够准确定量，但是由于免疫亲和柱与质谱检测成本高，应用范围受到限制。

方法优势：

    对比国标方法《GB/T 18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》，迪马科技开发的《DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的测定》采用检测成本较低的固相萃取-液相色谱法，也可达到准确定性定量，并且本方案具有：

前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好等特点；

避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素B1回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性；

过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用；

检出限是0.1 μg /kg，远低于国家标准和欧盟标准

(欧盟对植物油中黄曲霉毒素B1限量标准不得高于 2 μg /kg，我国标准《GB 2761-2011 食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》对其限量要求不得高于10 μg /kg)

以下为详细解决方案，敬请参考！

1、适用范围

本方案适用于DHA冬化油和植物油中黄曲霉毒素B1的检测，方法检出限是0.1 μg /kg。

2、提取

(1) 取0.5 g样品于15 mL离心管中，加入2 mL正己烷混匀，加入10 mL乙腈，涡旋混合2 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；

(2) 向步骤(1)下层残渣中加入10mL乙腈，按照步骤(1)重复提取一次，收集上清液。

(3) 合并步骤(1)、(2)的上清液，在40 ℃下减压蒸至低于5 mL，待净化。

3、净化——ProElut AFT-2 12 mL（Cat.#65906）

a活    化：向柱中加入10 mL乙腈，流出液弃去；

b上    样：加入待净化液，收集流出液；

c洗    脱：加入20 mL 乙腈，收集流出液，合并步骤(b)、(c)流出液；

d衍    生：将流出液在40 ℃下减压蒸至完全干燥，依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋紧玻璃塞充分混匀衍生液，45 ℃静置10 min，吹干衍生液，用流动相定容至1 mL。

4、色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）

流  速：1.0 mL/min   

进样量：20 μL  

柱  温：30 ℃

检测器：荧光检测器，Ex：365 nm；Em：435 nm

流动相：A：水；B：异丙醇+乙腈=3+2；A/B=8/2

5、添加回收结果

DHA冬化油中黄曲霉毒素B1的HPLC检测添加回收结果

植物油中黄曲霉毒素B1的HPLC检测添加回收结果 

油脂中黄曲霉毒素B1检测专用固相萃取柱

货号：65906

描述：ProElut AFT-2  12 mL  20/pkg

产品特点：ProElut AFT-2专用柱填料由多种吸附剂按照一定的比例分层填装而成，采用多种作用机理去除油脂以及其他杂质，适用于油脂类样品中黄曲霉毒素B1的检测；本产品避免了免疫亲和柱容易受环境影响而引起黄曲霉毒素B1回收率低和净化效果不好的弊端，保证了实验结果的重现性和准确性；本产品过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，成本相对较低，能被很多企事业单位采用。

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