RephiLe抗生素检测解决方案

　　近日，媒体曝光了肯德基的大供货商- 山西粟海集团“45天食用鸡”事件。一只鸡用饲料和药物喂养，从孵出到端上餐桌，只需要45天!报道称，仅在养殖阶段的11天中，就有多达11种抗生素药物喂给肉鸡。这则消息在网络上引起了广泛的关注和讨论。

　　抗生素(antibiotics)是由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类代谢产物。抗生素能干扰其他生活细胞发育功能。上世纪40年代，科学家们发现，饲料中添加抗生素或其发酵残渣，能促进畜禽生长。1950年，美国食品与药物管理局(FDA)首次批准在饲料中添加抗生素，以后，世界各国相继进行了抗生素的饲喂试验，并用于生产。中国农业部发布了《允许作饲料药物添加剂兽药品种及使用规定》，允许用作饲料添加剂的抗生素品种有3类30种，并分别对适用动物、最低用量、最高用量及停药期作了严格规定。可以说，正常添加的抗生素完全是合法合理的。而不合乎《允许作饲料药物添加剂兽药品种及使用规定》所添加的抗生素则是非法的。

　　目前常见的非法添加抗生素主要是抗生素的过量使用，以常见的抑菌类抗生素—金霉素为例，《允许作饲料药物添加剂兽药品种及使用规定》中指出，食用动物(包括肉鸡)的使用年龄上限为10周，最高用量为5000万单位/吨(配合饲料)，并且补充要求在高用量时低钙饲料连用不得超过5天。过量使用会导致鸡肉中残留金霉素超标。农业部《动物性食品中兽药最高残留限量(农业部2002年235号公告)》要求，金霉素在鸡肉中残留量不得超过100μg/kg。国家质量监督检验检疫总局也发布标准《GB/T 20764-2006 可食动物肌肉中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定液相色谱-紫外检测法》，明确了检测方法及检测限度。

　　根据《GB/T 20764-2006》，RephiLe特别推出鸡肉中金霉素检测的解决方案。采用HPLC检测法，检出限为0.005mg/kg。详细解决方案如下：

　　适用范围

　　适用于牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉和兔肉中的金霉素残留量的测定。

　　原理

　　用0.1 mol/LNa2EDTA-Mcllvaine(pH=4.0±0.05)缓冲液提取动物肌肉中金霉素残留，提取液经离心后，上清液用OasisHLB固相萃取柱和羧酸型阳离子交换柱纯化，HPLC检测，外标法定量。

　　样品提取

　　取样品1 kg，充分搅碎，混匀，分成两份，分别装入洁净容器中密封为试样。-18 ℃冷冻保存。称取样品6.00 g±0.01 g于50mL具塞离心管中，加入30 mL Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液。均质1 min后冰水浴超声10 min。提取液以10000r/min离心10 min，上清液倒入另一离心管中。残渣加入20 mL缓冲溶液重复提取一次。合并上清液。

　　净化

　　将样品提取上清液加入Oasis HLB固相萃取柱，流速≤3mL/min。上清液完全流出后用5mL甲醇+水(1+19)洗柱，并用真空泵抽干40分钟。弃去流出液。用15 mL乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液于100mL烧瓶中。

　　将上述洗脱液减压条件下以≤3mL/min得流速通过羧酸型阳离子交换柱。洗脱液完全流出后用5mL甲醇洗柱，并用真空泵抽干5分钟。弃去流出液。用4mL流动相：乙腈+甲醇+0.01mol/L草酸溶液(2+1+7)洗脱，收集洗脱液于5mL样品管中。定容至4mL。用13mm，0.22μm PTFE针头式过滤器过滤。

　　色谱

　　色谱柱：Mightsil RP-18 GP3μm(150mm×4.6 mm);

　　流动相：乙腈+甲醇+0.01mol/L草酸溶液(2+1+7)

　　流速：0.5 mL/min;

　　柱温：25℃;

　　进样量：60 μL。

　　为确保实验的准确性，液相用水必须使用符合中华人民共和国标准GB6682-2008的一级水。其他各种标准溶液的配置最少需要用到二级水。RephiLe的Direct-PureEDI与PURIST经典组合套装，可以同时提供高纯水及超纯水，满足全方位的实验室用水需求。RephiLe Direct-Pure EDI高纯水系统选用Siemens公司的EDI模块，以自来水为进水，提供稳定的高纯水，产品达到同类产品先进水平。PURIST系列超纯水系统，精致小巧，使用简便，以纯水为进水，生产超纯水，水质超过或达到GB以及ASTM、CAP、CLSI等的一级水标准。RephiLe纯水系统已通过FCC、CE等多种认证，同时有专业的验证工程师，提供所需的验证服务支持，以及通过各种标准所需的3Q认证，有助于协助用户通过GMP、GLP等体系认证，可以保证用户在使用中用水无忧。

　　为答谢广大用户的厚爱，RephiLe在2013年末推出特别促销活动，详情请关注RephiLe官网。
    为更好地保护HPLC仪器，上样前需将溶液预先过滤，除掉溶液中颗粒及微生物，防止色谱柱堵塞、损坏泵等情况发生，从而保证仪器的操作性能及延长仪器使用寿命。RephiLe提供PES、PTFE、Nylon、MCE等多种针头式过滤器，适用于色谱分析样品过滤。

　　RephiLe 相关产品信息：

　　RephiLe祝广大客户用水无忧，健康无忧!

　　关于 RephiLe：

　　RephiLe 是一家提供水纯化和实验室分离纯化产品的专业制造商和供应商，在实验室纯水及过滤领域具有深厚的技术背景。 RephiLe 根据自己的研发成果，以创新为驱动，以服务为导向，逐步建立了自己的产品品牌，拥有自主知识产权并获得多项专利。国际化运作的管理理念，完善、可靠的质量监测和保障体系，使 RephiLe 的产品可靠，一进入市场就受到广大用户的认可和青睐，在国内同类产品中处于高端领先的技术和质量水平。 RephiLe 已与国内外多家技术领先的机构有多层次的合作，产品销往欧美 60 多个国家。

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