2016/03/03 12:28
阅读:43
分享:方案摘要:
产品配置单:
大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒
型号: 96T/盒
产地:
品牌: Cusabio
面议
参考报价
联系电话
人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒
型号: 96T/盒
产地:
品牌: Cusabio
面议
参考报价
联系电话
方案详情:
人甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称:
通用名:人甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析试剂盒
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中甲胎蛋白(AFP)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白(AFP)水平。用纯化的人甲胎蛋白(AFP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白(AFP),再与HRP标记的甲胎蛋白(AFP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白(AFP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白(AFP)浓度。
试剂盒组成
1 | 20倍浓缩洗涤液 | 30ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(18μg/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为12μg/L,8μg/L ,4μg/L,2μg/L, 1μg/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
检测范围:
0.7μg/L -15μg/L
规格:
96人份/盒
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
厦门慧嘉生物科技有限公司专业代理众多国际生命科学领域的知名品牌。致力于各种ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、一抗二抗、细胞因子、生物试剂、移液器、耗材的销售推广及服务工作。
咨询电话:0592-6020891 18906011628 http://www.biohj.com QQ:1284882975
下载本篇解决方案:
台阶仪在三维形貌表征领域的应用
Stylus-based surface profiling is a standard technique for accurate, repeatable surface shape, topography and step height measurement in applications ranging from semiconductor R&D to solar cell QC.
2008/12/15
肿瘤特异性抗体功能分析
肿瘤特异性抗体功能分析包含很多方面: T细胞功能活化及增殖、细胞因子分析、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity; ADCC)、抗体介导的补体依赖的细胞毒性(complement dependent cytotoxicity; CDC)、巨噬细胞抗体依赖性的细胞吞噬作用(Antibody-Dependent Cellular Phagocytosis; ADCP)等。
制药
2021/04/28
基于紫外分光光度法的水中油测试方法
矿物油组成中的共轭体系物质在紫外光区有较强的吸收,依据朗博 - 比尔定律,在256nm紫外光波长,可测定油样的吸光度来确定相应油的量。 由于紫外光度法对于油种的敏感性较强,本方法的油样需采用标准物质。
环保
2021/05/31
布鲁克三维X射线显微镜在药物与医疗器械领域的应用
三维X射线显微镜是当前获取样品内部三维结构最有力的工具之一,而且作为无损的非破坏成像技术,它适用于各种形态的样品,无需包埋,镀层或切片等复杂的样品前处理。布鲁克skyscan系列三维X射线纤维成像系统,包含稳定易用的高分辨率成像设备,功能强大的软件套装,可为不同领域的应用提供完善的解决方案。 我们为大家带来桌面型三维X射线显微镜在药物与医疗器械领域的应用介绍。
医疗/卫生
2021/11/18