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高效液相色谱法快速检测饲料中氯米芬添加量
2017/03/08 10:06
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方案摘要：
产品配置单：
LC600A液相色谱仪
型号： LC-600(3)
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥5万 - 10万
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方案详情：
高效液相色谱法快速检测饲料中氯米芬添加量
氯米芬为非甾体化合物，对实验动物有微弱的雌激素活性，而在人体则有抗雌激素活性作用，可刺激排卵。具有较强的抗雌激素作用和较弱的雌激素活性。低剂量能促进垂体前叶分泌促性腺激素，从而诱发排卵；高剂量则明显抑制垂体促性腺激素的释放，对男性则有促进精子生成的作用，对少精症有效。在动物实验中可致畸胎。
氯米芬本身并不稳定，常规条件下以枸橼酸氯米芬的形式存在。生活水平日渐提高的当下，禽畜产品已成为百姓餐桌上见惯的菜肴。在禽畜的养殖中，若吃食了含有氯米芬添加剂的饲料，在动物体内难免会造成长期的氯米芬积累，再等到加工成肉制品进入到百姓生活、居民体内时，势必会引起人们身体健康的诸多问题。为了避免此类情况发生，就要杜绝动物体内氯米芬的残留，从源头饲料进行严格的质量把控。因此，建立一种合适的测定饲料中氯米芬含量的检测方法就具备了一定的必然性。
本文介绍一种基于相关文献基础上，结合目前饲料行业的情况，而设计的检测方法。即采用固相萃取-高效液相色谱法对饲料中的氯米芬进行分析和含量测定。此法回收率、灵敏度高，稳定性也很好。
仪器介绍
LC-600A智能全控液相色谱系统（南京科捷分析仪器有限公司）由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。
1、使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等；
2、具备多元高压洗脱、波长扫描等功能；
3、广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。
实验方法
样品处理：准确称取5.0mg预处理样品置于100mL离心管（按GB/T 14699和GB/T 20195采集、制备样品），加入甲醇25mL，使用涡旋混合器提取2min，然后以4000rpm离心15min。收集上清液于具塞试管，重复以上步骤一次，合并收集液备用。
依次使用5mL甲醇、5mL水活化固相萃取柱，准确量取10mL试液以1mL/min的流速通过小柱，再依次使用25乙酸溶液5mL、甲醇5mL淋洗柱子，再用5%氨化甲醇溶液5mL洗脱，收集洗脱液，40℃氮吹仪吹干。准确加入1mL甲醇溶液，涡旋30s后过0.22μm滤膜，准备进样检测。
分析条件：
检测器 | 紫外检测器和二极管阵列检测器 |
色谱柱 | C18柱250mm×4.6mm，5μm |
流动相 | 甲醇-磷酸溶液（75：25，PH=4.10） |
流速 | 1mL/min |
检测波长 | 33nm |
进样量 | 20μL |
色谱图
见附件
饲料中氯米芬的液相色谱图
A、反式氯米芬 B、顺式氯米芬
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