关注
已关注
已认证
粉丝量 0
液相色谱法检测血浆中牛磺酸的浓度
2016/04/20 11:31
阅读：152
分享：
方案摘要：
产品配置单：
科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪
型号： KJ LC600C
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥10万 - 20万
参考报价
联系电话
方案详情：
牛磺酸是存在于动物以及人体内的非蛋白质游离氨基酸，它具有消炎、镇痛、解热、镇静、保护心肌、抗脑缺血及增强免疫力等作用，是人类必需氨基酸。
牛磺酸的含量检测方法较多，目前常用的方法有酸碱滴定法、分光光度法、气相色谱法、氨基酸自动分析法、荧光法及高效液相色谱法（HPLC）等。
牛磺酸的HPLC法测定本用柱前或柱后衍生的方法，衍生试剂为2，4－二硝基氟苯（DNFB）、邻苯二甲醛（OPA）、异硫氰酸苯酯（PITC）及9－氯甲酸芴甲酯（FMOC）等。
这里介绍用DNFB柱前衍生化法和梯度洗脱的方式分离各成分，建立人血浆中牛磺酸的定量测定方法。
方法仪器：高效液相色谱仪。
色谱条件：C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相A为0.05mol/L乙酸钠溶液（pH6.5），流动相B为乙腈－水（1∶1），梯度洗脱，流速为1mL/min，柱温30℃，检测波长360nm，进样量20μL。
溶液配制
流动相A：取无水乙酸钠4.1g，加水至1000mL，加乙酸10μL，配至浓度为0.05mol/L，pH为7.0；流动相B为乙腈－水（1∶1），超声除气；
磷酸盐缓冲溶液（pH7.0）：取磷酸二氢钾6.8g，加0.1mol/L的氢氧化钠291mL，加水至1000mL，pH为7.0；
牛磺酸储备液：取牛磺酸20mg，加水定容至10mL，质量浓度为2mg/ml；
DNFB衍生试剂：取DNFB250μL，加乙腈至25mL，浓度为1%；碳酸氢钠溶液：碳酸氢钠21g，加水至500mL，浓度为0.5mol/l。其中，流动相A、流动相B、磷酸盐缓冲溶液和碳酸氢钠溶液均经0.45μm滤膜滤过。
测定：取人血浆样品500μL和乙腈500μL混匀10s，以4000r/min离心5min。取上清液600μL至5mL容量瓶中，加入碳酸氢钠600μL及DNFB375μL后，在60℃避光条件下水浴1h。取出后，加缓冲液至5mL容量瓶刻度，微孔滤膜滤过。取上清液20μL进样测定。
下载本篇解决方案：
更多
Milli-Q IX 纯水系统：溶出度检测纯水解决方案
纯水是制备溶出溶剂或生物相关溶液的重要成分，因此水质的好坏会影响结果。一旦水质选择不当，就会引入污染物，主要有以下几种类型。使用高质量纯水来制备溶出溶剂，是获取精确、可重现结果并满足监管要求的重要保障。
制药/生物制药
2020/07/29
qTOWER3G上进行新型冠状病毒SARS-COV-2的qPCR检测
市面上有众多的新冠病毒qPCR检测试剂盒，本应用方案采用韩国Seegene公司的AllplexTM 2019-nCoV检测试剂盒在耶拿荧光定量PCR仪 qTOWER³G上进行样品检测，获得符合预期的结果。
生物产业
2020/10/20
肿瘤特异性抗体功能分析
肿瘤特异性抗体功能分析包含很多方面： T细胞功能活化及增殖、细胞因子分析、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity; ADCC）、抗体介导的补体依赖的细胞毒性（complement dependent cytotoxicity; CDC）、巨噬细胞抗体依赖性的细胞吞噬作用（Antibody-Dependent Cellular Phagocytosis; ADCP）等。
制药/生物制药
2021/04/28
双相不锈钢的增强纳米压痕应用
Using Bruker’s Hysitron PI 88 SEM PicoIndenter equipped with tilt and rotation stages in conjunction with the QUANTAX EBSD system enables a more robust characterization of metallic materials by combining high resolution phase and grain orientation mapping capabilities with targeted nanomechanical property measurements. This combination could also be used to extend the scope of research related to other advanced textured, anisotropic, or multi-phase materials.
钢铁/金属
2021/09/02
