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液相色谱仪测定食品中β-胡萝卜素含量
2016/02/18 10:57
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方案摘要：
产品配置单：
科捷仪器LC600C 梯度液相色谱仪
型号： KJ LC600C
产地： 江苏
品牌： 南京科捷
¥10万 - 20万
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方案详情：
样品中的β-胡萝卜素，用石油醚-丙酮（80:20）混合液提取，经氧化铝柱纯化，然后以高效液相色谱仪测定，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。
测定所需仪器：高效液相色谱仪、具可调波长紫外可见检测器；离心机；旋转蒸发器。
测定步骤：
1 样品提取
淀粉类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中混合液提取，吸取上层黄色液体并转入蒸发器中，重复提取直至提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器上蒸发至干。
液体样品。吸取10.0mL样品于250mL分液漏斗中，加入石油醚-丙酮（80:20）20mL提取，然后静置分层，将下层水溶液放入另一分液漏斗中再提取，直至提取液无色为止。合并提取液，在旋转蒸发器上蒸发至干。
油类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中，加入石油醚-丙酮（80:20）提取，反复提取，直至上层提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器蒸发至干。
2 纯化
将上述样品提取液残渣，用少量石油醚溶解，然后进行氧化铝柱色谱。先用洗脱液丙酮-石油醚洗氧化铝柱，然后再加入溶解样品提取液的溶液，用丙酮-石油醚洗脱β-胡罗素，控制流速为20滴/min，收集于10mL容量瓶中，用洗脱液定容至刻度。用0.45µm微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。
3 HPLC参考条件
流动相：甲醇+乙腈（90+10）；流速1.2ml/min；波长448nm。
4 样品测定
吸取已纯化的溶液20µL，注入高效液相色谱仪，依法操作，从标准曲线查得或回归求得被测液中所含β-胡罗卜素的量。
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