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默克手性拆分的那些事儿—大环糖肽类手性固定相的应用特点
Q: 还记得大环糖肽型手性固定相与市场上众多其他手性色谱柱产品相比，优势主要体现在什么方面吗？
答案：具有离子相互作用。
离子相互作用主要是因为其手性分子（氨基酸）中既含有碱性的伯氨基团，又含有酸性的羧基。该结构特征对手性分离提供了多种作用，并且在很大程度上使它们在水性和非水性溶剂中对极性和可电离分析物具有理想的保留特性。
图1 大环糖肽型万古霉素手性固定相
以万古霉素分子为例，由两个结构单元组成，即亲水的糖基部分（氨基糖和葡萄糖）和疏水的肽基部分（7个氨基酸交联而成的三环刚性骨架）
总结
离子相互作用——针对极性化合物分离和较好LC-MS的兼容性
那接下来跟上小编的节奏，我们来看看在离子相互作用下，具体有哪些应用案例。……
应用案例：
一．盐酸克伦特罗
β受体阻断剂是能选择性地与β肾上腺素受体结合、从而拮抗神经递质和儿茶酚胺对β受体的激动作用的一种药物类型，是一种常用于治疗心血管，治疗高血压和呼吸道疾病的药物。
盐酸克伦特罗，是一种肾上腺素支气管解痉药物，它对支气管平滑肌β2受体的兴奋作用具有较好的选择性,同时也具有扩张支气管作用。
实验条件
色谱柱 | Astec CHIROBIOTIC T, 100 mm x 2.1 mm, 5 µm （12018AST） |
流动相 | 10mM 甲酸铵的甲醇溶液 |
流速 | 0.3 mL/min |
柱温 | 30℃ |
检测器 | MS ESI (+) |
分析物 | 小鼠血清中的克伦特罗（10ng/mL） |
图2 小鼠血清中的克伦特罗手性拆分
二. 其他β受体阻断剂
实验条件：
色谱柱 | Astec CHIROBIOTIC T, 250 mm x 4.6 mm, 5 µm （12024AST） |
流动相 | 15mM 甲酸铵的甲醇溶液 |
流速 | 1.0 mL/min |
柱温 | 25℃ |
检测器 | UV 波长为220nm |
分析物 | 按出峰顺序：1.克伦特罗2.美洛托尔3.甲磺胺心定4.阿替洛尔 |
图3 β受体阻断剂在大环糖肽类固定相上的离子相互作用模式下手性拆分
三. 2-羟基戊二酸——先天性代谢缺陷
2-羟基戊二酸（2-OHG）又称为α-羟基戊二酸 （α-Hydroxyglutaric acid），是一种α-羟基酸。健康和病变的生物细胞的生化途径不同，2-羟基戊二酸 是其中比较重要的先天性代谢缺陷的生物分子标志物，D-2-OHG和L-2-OHG的手性鉴别和定量是表征神经代谢紊乱（如2-羟基戊二酸尿症）的关键，2-羟基戊二酸尿症可导致早期神经损伤。
实验条件：
色谱柱 | Astec CHIROBIOTIC R, 100 mm x 4.6 mm, 5 µm （13022AST） |
流动相 | 甲醇/水=95/5，0.3%乙酸和0.1%氨水 |
流速 | 1.0 mL/min，运行压力 1700psi (117bar) |
柱温 | 25℃ |
检测器 | MS ESI (-) TOF, SIM, m/z 147.03, split 100:1 |
进样量 | 10 μL |
分析物 | D,L-2羟基戊二酸，浓度为1mg/mL，溶剂为水/甲醇（50/50） |
图4 2-羟基戊二酸在大环糖肽类固定相上的离子相互作用模式下的手性拆分
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