应用速递|食品安全—默克Supelco可对牛奶中替米考星残留量的测定

样品制备

取牛奶5 mL于离心管中，加入乙腈15 mL，涡旋混合30s，超声1 min，以6000 r/min离心5 min，将上清液转入150 mL锥形瓶中，加水50 mL稀释，备用

1.平衡

依次用10 mL甲醇和10 mL水活化

2.上样

取2 mL样品溶液上柱

3.洗脱

依次用10 mL水和10 mL乙腈洗涤

4.收集

用5 mL洗脱液(制备方法：称取乙酸铵7.71 g溶解于甲醇200 mL中，加入乙腈790 mL，冷却至室温，用乙腈稀释至1000 mL)收集

后处理

氮气吹干，用流动相1 mL溶解残留物，0.22 μm滤膜过滤后，供高效液相色谱分析

仪器

1260 Infinity

流动相

取110 mL乙腈、55 mL四氢呋喃和25 mL 1 moL/L DBAP，加入700 mL水中，用水稀释至1000 mL过滤。

1 moL/L 磷酸二丁胺缓冲液（DBAP）：量取水700 mL，加入二丁胺约70 mL, 搅拌使二丁胺溶解，冷却至室温。调pH至2.5~2.6，加水稀释至1000 mL, 过滤。

流速

1.0 mL/min

检测波长

254 nm

进样量

50 μL

柱温

40 °C

系统压力

96 bar (1392 psi)

1

替米考星反式异构体

5.7

/

6779

0.85

2

替米考星顺式异构体

6.6

3.07

7086

0.85

1

替米考星反式异构体

5.7

10.3

0.86

0.93

2

替米考星顺式异构体

6.6

89.7

1.00

0.93

Std 1

22.4

Std 2

23.0

Std 3

23.1

Std 4

23.6

Std 5

22.9

Mean

23.0

Standard deviation

0.4

RSD (%)

1.9

Sample 1

102.3

Sample 2

98.7

Sample 3

99.7

Mean

100.2

Standard deviation

1.85

RSD (%)

0.1

0.025

0.85

0.05

2.12

0.1

3.81

0.25

8.43

0.5

22.4

1.0

42.7

2.0

91.6

50.0

1117

Discovery® HS C18 15 cm x 4.6 mm, 5 μm

 568522-U

Discovery® DSC-18 SPE, 500 mg/6 ml

52604-U

甲醇, 梯度级别 for liquid chromatography LiChrosolv®

1.06007

乙腈, 梯度级别for liquid chromatography LiChrosolv®

1.00030

四氢呋喃, 梯度级别 for liquid chromatography LiChrosolv®

 1.08101

正磷酸, for analysis EMSURE® ACS, ISO, Reag. Ph Eur

1.00573

醋酸铵, for analysis EMSURE® ACS,Reag. Ph Eur

 1.01116

二丁胺, ≥99.5%

471232